EB病毒Zta优势表位抗原的克隆表达及其活性初步评价

发布时间：2024-05-23 02:28

　　目的:制备高活性EB病毒Zta优势表位抗原并初步评价抗原活性。方法:利用生物学软件分析Zta抗原的B细胞表位分布,选取含有优势表位的抗原区段,然后利用分子生物学技术进行克隆表达获得纯化抗原,采用ELISA方法初步评价优势表位抗原的检测性能。结果:筛选确定Zta优势表位抗原区段为1～185 aa,并获得了高效表达的Zta优势表位抗原,基于该抗原建立的Zta-IgA间接ELISA方法可以有效区分鼻咽癌患者和健康对照。结论:获得的优势表位抗原Zta可用于鼻咽癌患者的早期筛查和诊断。

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【部分图文】：

图1Zta抗原B细胞表位分析

将PCR产物纯化后经双酶切克隆至pBVGST载体，构建表达质粒pBVGST-Zta。将测序正确的重组质粒转化大肠杆菌诱导表达，Zta优势表位抗原为包涵体表达，表达量较高，Ni柱纯化后获得纯化抗原，SDS-PAGE鉴定结果显示Zta优势表位抗原相对分子质量约为38.3×103，经测....

图2Zta优势表位抗原基因PCR扩增产物电泳鉴定M:DL2000DNAmarker;1:Zta优势表位抗原基因（555bp)

图1Zta抗原B细胞表位分析2.4抗原活性初步评价

图3Zta抗原的SDS-PAGE鉴定

EBV是鼻咽癌的重要诱发因子，鼻咽癌患者一般在症状出现前3年血清EBV抗体水平呈持续升高，尤其是IgA抗体水平，借此可以实现NPC患者的早期筛查和诊断[6-7]。但目前所使用的检测试剂盒的特异性、敏感度均不能达到令人满意的临床效果，因此制备优质抗原成为进一步提高检测灵敏度和特异性....

图4Zta优势表位抗原血清学检测性能

图3Zta抗原的SDS-PAGE鉴定EBV在细胞中的生活周期可分为潜伏期和裂解期，在生活周期的不同阶段可表达不同的蛋白产物。EBV在裂解期所表达的病毒蛋白可分为立即早期蛋白、早期蛋白及晚期蛋白3类。其中，早期蛋白与病毒DNA复制有关，晚期蛋白与病毒包装有关，而立即早期蛋白则主要....

本文编号：3980870