S1P通过S1PR1/IκBα/NF-κB途径促炎症诱导HLEC管形成

发布时间：2024-11-22 16:33

　　【背景、目的】炎症诱导的淋巴管生成是一种被广泛接受的概念。在健康的成年人中,淋巴管系统是稳定的。然而,在炎症条件下淋巴管发生急性扩张。动脉粥样硬化是一种慢性炎症过程。在动脉粥样硬化的早期阶段,外膜淋巴管的密度随着疾病的程度加重而增加,但具体机制尚不清楚。随着研究的进展,淋巴管功能的激活一方面不仅干预着炎症过程。另一方面,斑块胆固醇的逆向转运也依赖于淋巴管运输。近期研究表明鞘氨醇-1-磷酸（S1P）不仅与动脉粥样硬化的慢性炎症过程密切相关,而且还影响血管生成。因此,本论文的目的是探究S1P是否通过炎症影响淋巴管的生成及其机制。【实验方法】（1）将人原代淋巴内皮细胞（HLECs）放在含有10%胎牛血清（FBS）的DMEM中生长（5%CO₂,37℃）,并在第2代和第8代之间使用。在用试剂处理细胞之前,先将细胞放在含有1%FBS的DMEM中饥饿培养10 h。然后再将细胞与不同浓度的S1P（0、50、100、200和400 nM）共同孵育24 h。使用CCK-8法检测细胞增殖、细胞划痕法检测细胞迁移以及基质胶小管形成法检测细胞小管形成。（2）不同浓度的S1P（0、50、100...

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第1章 前言
第2章 实验材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 细胞来源
        2.1.2 主要实验试剂
        2.1.3 主要实验仪器
        2.1.4 主要基本试剂的配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 实验分组
        2.2.2 人淋巴内皮细胞的培养
        2.2.3 人淋巴内皮细胞的冻存
        2.2.4 细胞增殖、迁移和管形成检测
        2.2.5 蛋白提取与Western blot
        2.2.6 ELISA
        2.2.7 Real-time PCR和 siRNA转染
        2.2.8 免疫荧光实验
        2.2.9 小鼠的饮食与治疗
        2.2.10 S1P受体的阻断和NF-κB的抑制
        2.2.11 免疫组化
        2.2.12 统计分析
第3章 实验结果
    3.1 S1P对 HLEC增殖、迁移和管形成的影响
    3.2 不同浓度与时间的S1P对HLECs中炎症因子分泌的影响
    3.3 炎症因子对HLEC增殖、迁移和管形成的影响
    3.4 S1P受体在HLECs中的表达模式
    3.5 S1P通过S1PR1 介导HLECs促炎效应
    3.6 IκBα/NF-κB通路对S1P诱导HLECs炎症的影响
    3.7 S1PR1/NF-κB通路对S1P诱导HLEC管形成的影响
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
文献综述
    References
硕士期间的科研成果
致谢
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本文编号：4012489