慢性间歇缺氧纤维化大鼠模型心房组织中lncRNA表达谱的研究

发布时间：2025-02-09 20:07

　　目的:在慢性间歇性缺氧状态下建立心房纤维化模型后,使用高通量测序技术分析心房组织中的lncRNA表达谱,通过RT-PCR验证深度测序结果的可靠性,并进行生物学分析,为心房纤维化的上游治疗方法提供新的思路及方向。方法:(1)建立大鼠慢性间歇缺氧心房纤维化模型将40只SD大鼠随机分为对照组(C组),间歇缺氧组(CIH组),通过对CIH组大鼠连续间歇缺氧4周建立大鼠心房纤维化模型。建模完成后检查两组大鼠心脏超声,同时测量大鼠血压、心电图。最后获取大鼠心房组织后通过HE染色观察模型组与对照组心肌细胞的排列及大小;Masson染色比较对照与模型组心房组织胶原纤维含量的变化;免疫组织化学及Western bolt比较两组纤维化相关因子(Ⅰ型胶原、 Ⅱ Ⅲ型胶原、CTGF、TGF-β1)的变化,从而验证模型建立成功。(2)慢性间歇缺氧模型中心房组织的lncRNA表达谱研究采用高通量测序技术检测9对心房组织中lncRNA的表达谱,并筛选差异表达lncRNA,绘制火山图、聚类图等显示差异表达的lncRNAs。随机选取5个差异表达的lncRNAs(NONRATT011456.2,NONRATT013797....

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、建立慢性间歇缺氧大鼠心房纤维化模型
    1.1 对象和方法
        1.1.1 实验动物和分组
        1.1.2 实验仪器及试剂
        1.1.3 建立心房纤维化模型
        1.1.4 心脏彩超测量
        1.1.5 血压、心电图监测
        1.1.6 心房组织获取
        1.1.7 心房组织固定、脱水、包埋及切片
        1.1.8 HE染色
        1.1.9 Masson染色
        1.1.10 免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)染色
        1.1.11 Western Blot实验
        1.1.12 统计学方法
    1.2 结果
        1.2.1 基础参数及心脏超声资料
        1.2.2 心电、血压指标
        1.2.3 心房组织病理学变化
        1.2.4 Western blot实验结果
    1.3 讨论
    1.4 小结
二、慢性间歇缺氧模型中心房组织lncRNA的表达谱研究
    2.1 对象和方法
        2.1.1 实验对象
        2.1.2 实验设备及试剂
        2.1.3 LncRNA表达谱的鉴定
        2.1.4 RT-PCR实验验证高通量测序结果
        2.1.5 生物信息学分析
        2.1.6 构建lncRNA-miRNA-mRNA网络
        2.1.7 统计学方法
    2.2 结果
        2.2.1 RNA质量检测结果
        2.2.2 原始数据质量控制
        2.2.3 大鼠心房组织lncRNA一般特性
        2.2.4 差异lncRNA筛选
        2.2.5 差异表达基因的火山图
        2.2.6 LncRNA的聚类分析
        2.2.7 RT-PCR法验证差异表达的lncRNA
        2.2.8 GO分析
        2.2.9 KEGG结果
        2.2.10 lncRNA-miRNA-mRNA网络图
    2.3 讨论
    2.4 小结
结论
论文创新点
论文局限性
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 LncRNA与心血管疾病的研究进展
    综述参考文献
致谢
个人简历



本文编号：4032799