苏丹黑B降低大鼠肠道自发荧光及其在免疫荧光染色中的应用

发布时间：2025-03-14 23:02

　　 目的探讨降低大鼠肠道组织自发荧光的简便可行方法。方法取正常SD大鼠(n=5)肠道做冷冻切片,荧光显微镜下观察自发荧光(AF),检测苏丹黑B(SBB)对AF的影响及其在肠道免疫荧光(IF)染色中的应用。结果大鼠各肠段组织在FITC和TRITC通道存在大量明显的AF,且不受血清封闭的影响;应用0. 3%SBB处理组织10 min,可显著降低AF; IF染色加SBB处理后的肠道可见AF显著降低,目的蛋白的荧光表达不受影响。结论0. 3%SBB染色10 min能显著降低大鼠肠道组织的AF,使IF特异性染色更加鲜明。

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【部分图文】：

图1 空肠、回肠和结肠内存在大量AF

光学显微镜下SBB染色形成的黑色点状着色产物是判断AF下降程度的参考指标，数量越多，AF的降低越显著[12]。我们应用不同浓度的SBB染液对组织进行染色，结果显示，除黏膜上皮层外，其余各层均存在明显的点状着色(图3A2～3A4,3B2～3B4)。与0.1%SBB染色比较，使用0.....

图3 0.3%SBB染色10 min时染色效果最佳标尺示50μm

图2血清封闭不能降低回肠内AF图4SBB处理显著降低大鼠空肠、回肠和结肠中的AF

图5 SBB处理显著提高大鼠肠道CD45 IF染色的特异性免疫荧光

图4SBB处理显著降低大鼠空肠、回肠和结肠中的AFSBB是一种稳定无毒的脂溶性染料，可通过与脂褐素等脂质结合从而吸收由其产生的AF，从而发挥其荧光遮盖作用[6]。但SBB能否应用于降低大鼠肠道AF，以及SBB的应用浓度与时间，目前尚鲜见报道。本研究发现，0.3%SBB处理组织1....

图2 血清封闭不能降低回肠内AF

图1空肠、回肠和结肠内存在大量AF图30.3%SBB染色10min时染色效果最佳标尺示50μm

本文编号：4034752