化瘀涤痰汤对急性硬膜下血肿模型大鼠抗血管新生和BBB保护作用的研究

发布时间：2017-05-29 19:01

  本文关键词：化瘀涤痰汤对急性硬膜下血肿模型大鼠抗血管新生和BBB保护作用的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的1、通过注射自体血液致大鼠硬膜下血肿模型及其稳定性研究,为实验提供最合适的动物模型2、复制急性硬膜下血肿大鼠模型,在给予化瘀涤痰汤14天后,检测各组大鼠脑血浆中PT、TT、FG含量,血浆中VEGF、NO、ET-1含量,化瘀涤痰汤的抗凝血作用与促血肿消散作用,以及脑组织中VEGF和b FGF的m RNA表达量,脑组织中VEGF、b FGF、HIF-1α、Claudin-5蛋白的表达量和NSE、S100B含量来探索化瘀涤痰汤对急性硬膜下血肿模型大鼠脑组织中HIF-α和Claudin-5蛋白表达的调节作用,探讨化瘀涤痰汤的抗畸形血管新生以及对BBB的保护作用。方法1、将大鼠随机分为假手术组和300μl、500μl、700μl(即分别向硬模下注射300μl、500μl、700μl的自体血液)模型组。分别于术后第2、4、6、8、10、14天,每组各取6只,以腹主动脉取血,取脑组织,并采用酶联免疫吸附(ELISA)方法测定各组大鼠血浆中NSE、S100B蛋白的含量。2、建立硬膜下血肿大鼠模型,以天丹通络胶囊为阳性对照药(0.54g/kg),观察给予化瘀涤痰汤大、中、小剂量组(56.62g/kg,28.26g/kg,14.13g/kg)的硬膜下模型大鼠的血肿面积,末次给药后取血浆采用酶联免疫吸附(ELISA)方法测定各组大鼠血浆中PT、TT、FG、NO、ET-1和VEGF的含量。3、采用RT-PCR方法来检测模型大鼠血肿侧脑组织中VEGF和b FGF的m RNA表达量,采用WB脑组织中VEGF、b FGF、HIF-1α、Claudin-5蛋白的表达量以及Elisa法检测血清中NSE、S100B含量。结果1、不同注血剂量对急性硬膜下大鼠模型稳定性影响与假手术组比较,300μl组血液的NSE在第2、4天时显著增加,在第6、8天时渐渐减少,说明血肿开始消散,在第10、14天时恢复到接近假手术组;500μl组和700μl组的NSE含量在第2、6、8、10、14天时都显著升高,而在第4d时升高不明显。300μl组血液的S100B蛋白含量在第4天时较高,在第2、6天时较低,在第8、10、14天时含量接近假手术组,说明血肿自行消散,损伤自行修复;500μl组和700μl组的S100B蛋白含量一直处于较高的状态。2、化瘀涤痰汤对硬膜下血肿模型大鼠模型抗凝血以及促血肿消散的影响HG、HZ和HD剂量组能够减小硬膜下血肿模型大鼠血肿面积,降低血浆中TT水平,升高FG、PT水平,其中HG、HZ剂量组具有更好的效果,大鼠血浆中NO含量明显降低,ET-1含量明显升高,NO/ET-1比值失衡,VEGF的含量明显上升。与模型组比较,HD剂量组、HZ剂量组、HX剂量组以及阳性组NO的含量均显著升高;HD剂量组和阳性组的ET-1含量显著降低,而其他剂量组虽有降低但差异不显著,各组的NO/ET-1比值趋向假手术组,作用效果与阳性药相似;HD剂量组VEGF的含量显著下降,HZ剂量组的含量也明显降低而阳性药组的含量无明显变化。3、化瘀涤痰汤的抗畸形血管新生以及对BBB的保护作用模型组大鼠注血侧脑组织中的VEGF和b FGF m RNA的表达显著升高蛋白含量均升高,与模型组比较,HG、HZ和HD剂量组以及TD组大鼠脑组织中VEGF和b FGF m RNA表达均明显降低,蛋白的含量均降低。与假手术组比较,模型组大鼠注血侧脑组织中HIF-1α蛋白表达量均上调,Claudin-5的蛋白表达量显著降低,模型组大鼠血清中NSE和S100B的含量均上升,与模型组比较,HG、HZ、HD组和TD组HIF-1α的表达均显著下调,HG组和TD组大鼠脑组织中Claudin-5表达均升高,HG、HZ、HD和TD组NSE、S100B含量均降低。结论1、大鼠硬膜下注射500μl自体血复制的大鼠急性硬膜下血肿模型稳定性更好,有利于实验研究。2、化瘀涤痰汤能够显著下调VEGF和b FGF的m RNA表达以及蛋白表达,从而对畸形血管的新生起到抑制作用。3、化瘀涤痰汤通过降低急性硬膜下血肿大鼠脑组织中HIF-1α蛋白表达并增加Claudin-5蛋白的表达来保护BBB。
【关键词】：化瘀涤痰汤 急性硬膜下血肿 抗凝血 抗血管新生 BBB
【学位授予单位】：安徽中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5;R-332
【目录】：

• 中文摘要7-10
• ABSTRACT10-13
• 英文缩略词对照（ABBREVIATION）13-15
• 第一部分 注血剂量对急性硬膜下血肿模型稳定性的影响15-30
• 1 前言15-16
• 2 实验材料16
• 2.1 动物16
• 2.2 药品和试剂16
• 2.3 仪器设备16
• 3 实验方法16-19
• 3.1 动物分组16
• 3.2 模型建立16-17
• 3.3 动物处死与取材17
• 3.4 指标检测17-19
• 3.5 统计学处理19
• 4 结果19-24
• 4.1 不同注血剂量各组的成活率比较19-20
• 4.2 不同注血量所致血肿在造模过程中的消散状况比较20-22
• 4.3 各组模型大鼠血浆中NSE含量随时间变化的影响22-23
• 4.4 各组模型大鼠血浆中S100B含量随时间变化的影响23-24
• 5 讨论24-27
• 6 结论27
• 第一部分参考文献27-30
• 第二部分 化瘀涤痰汤对急性硬膜下大鼠模型抗血管新生和对BBB的保护作用的实验研究30-62
• 1 前言30-32
• 2 材料32-35
• 2.1 实验动物32
• 2.2 实验试剂32-33
• 2.3 主要仪器33-35
• 3 方法35-42
• 3.1 模型制备35
• 3.2 动物分组及给药35
• 3.3 指标检测35-42
• 3.4 统计学处理42
• 4 结果42-53
• 4.1 化瘀涤痰汤对急性硬膜下血肿模型大鼠硬膜下血肿面积的影响42-43
• 4.2 化瘀涤痰汤对硬膜下血肿模型大鼠血浆中PT、TT和FG含量的影响43-44
• 4.3 化瘀涤痰汤对模型大鼠血浆中VEGF、NO、ET-1 和NO/ET-1 比值的影响44-45
• 4.4 化瘀涤痰汤对模型大鼠血清中NSE和S100B含量的影响45-47
• 4.5 化瘀涤痰汤对模型大鼠脑组织中VEGF和bFGF的mRNA含量的影响47-50
• 4.6 化瘀涤痰汤对模型大鼠脑组织中VEGF、bFGF、HIF-1α和Claudin-5 蛋白含量的影响50-53
• 5 讨论53-56
• 5.1 化瘀涤痰汤的抗凝血作用与促血肿消散作用53-55
• 5.2 化瘀涤痰汤抗畸形血管新生以及对BBB的保护作用55-56
• 6 结论56-58
• 第二部分参考文献58-62
• 综述62-68
• 参考文献65-68
• 附录68-69
• 个人简历68
• 硕士期间发表的科研论文68-69
• 致谢69

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

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中国博士学位论文全文数据库 前1条

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本文编号：405455