小鼠软骨内成骨过程中软骨细胞发育与淋巴管生长的研究

发布时间：2017-06-08 23:10

  本文关键词：小鼠软骨内成骨过程中软骨细胞发育与淋巴管生长的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究目的：本论文通过观察软骨细胞Ⅱ型胶原,以研究软骨细胞在软骨内成骨过程中的发育情况,并通过检测淋巴管内皮细胞标志物LYVE-1与促淋巴管生长因子VEGF-C的表达,阐明软骨内成骨过程中VEGF-C对软骨成骨过程中淋巴管生长发育的影响,并分析了淋巴管与软骨内成骨的关系,并为软骨内成骨过程以及生长软骨损伤的修复提供理论参考,也对青少年骨的健康发育有着积极意义。研究方法：取昆明小鼠第1、3、5、7、9、11、13、15、17、19天日龄仔鼠的双侧股骨,采用HE染色法观察股骨软骨发育过程中软骨细胞形态变化和血管侵入情况,运用免疫组织化学法观察股骨中Ⅱ型胶原、LYVE-1的表达情况,利用RT-PCR检测Ⅱ型胶原、LYVE-1和VEGF-C表达。研究结果：1.股骨生长发育过程表现为软骨内成骨,仔鼠出生前股骨初级骨化中心已形成,次级骨化中心尚未形成。2.第7天血管侵入骨骺,次级骨化中心开始形成。随着日龄增大次级骨化中心不断扩大,第13天骨骺生长区大量血管侵入,软骨外基质大面积钙化,第19天血管侵入减少,但骨骺仍未完全钙化。3.伴随软骨细胞的增殖分化,Ⅱ型胶原主要在增殖和肥大软骨细胞上表达。LYVE-1肥大软骨细胞与成骨区表达。Ⅱ型胶原随着日龄增大,表达量呈现升高趋势,第15天后开始下降。LYVE-1mRNA在第5天与13天表达呈上升趋势。VEGF-CmRNA表达与LYVE-1mRNA表达呈正相关,整体趋势基本保持一致。研究结论：1.股骨骨化表现为软骨内成骨,初级骨化中心与次级骨化中心软骨发育有差异,次级骨化中心无软骨细胞肥大期。2.股骨内骨化过程中有毛细淋巴管存在,且主要存在于软骨细胞肥大区与成骨区。3.血管生长因子VEGF-CmRNA变化趋势与LYVE-1mRNA呈正相关,与淋巴管生长变化一致。
【关键词】：软骨内骨化 Ⅱ型胶原 LYVE-1 VEGF-C 淋巴管
【学位授予单位】：华中师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R336
【目录】：

• 摘要5-6
• Abstract6-9
• 1. 引言9-11
• 2. 文献综述11-22
• 2.1 软骨内成骨11-16
• 2.1.1 软骨细胞11
• 2.1.2 软骨外基质与Ⅱ型胶原11-12
• 2.1.3 软骨细胞的增殖与分化12-13
• 2.1.4 软骨细胞的成熟13
• 2.1.5 生长因子与转录因子的调控13-14
• 2.1.6 血管侵入14-16
• 2.2 淋巴管16-22
• 2.2.1 淋巴管的生长与功能16-17
• 2.2.2 淋巴管内皮细胞标志物17
• 2.2.3 促淋巴管内皮细胞生长因子17-22
• 3. 实验材料和实验方法22-27
• 3.1 实验器材与主要试剂22-23
• 3.1.1 实验器材22
• 3.1.2 主要试剂22-23
• 3.2 实验方法23-27
• 3.2.1 动物模型23-24
• 3.2.2 HE染色24-25
• 3.2.3 RT-PCR25-26
• 3.2.4 数据分析26-27
• 4. 实验结果27-36
• 4.1 HE染色结果27-29
• 4.2 Ⅱ型胶原蛋白在不同日龄仔鼠股骨中的表达29-30
• 4.3 LYVE-1蛋白在不同日龄仔鼠股骨中的表达30-32
• 4.4 Collagen Ⅱ mRNA、LYVE-1mRNA、VEGF-CmRNA在不同日龄仔鼠股骨中的表达32-36
• 5. 讨论与分析36-40
• 5.1 软骨内成骨过程中软骨细胞发育与Ⅱ型胶原的表达36-37
• 5.2 软骨内成骨过程中LYVE-1的变化与软骨外基质的重建37-38
• 5.3 VEGF-C对淋巴管生长的影响38-40
• 6 结论40-41
• 7. 展望41-42
• 参考文献42-48
• 致谢48

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2 任宏造;;软骨细胞的超生结构病理[A];第六次全国电子显微学会议论文摘要集[C];1990年

3 张杨;崔丽;郭悦;孙晓雷;李秀兰;;滑膜细胞微环境对软骨细胞生物学活性的影响[A];第十八届全国中西医结合骨伤科学术研讨会论文汇编[C];2011年

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5 周红辉;万福生;;人骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞的实验研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会论文集[C];2006年

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1 聂翠蓉;英科学家从成人骨骼中找到软骨干细胞[N];科技日报;2008年

2 吴一福;西安交大：用人胎儿软骨细胞培养成功软骨组织工程种子细胞[N];中国医药报;2006年

3 中文;人体软骨举足轻重[N];广东科技报;2000年

4 刘霞;英用患者组织细胞成功培育出再生软骨[N];科技日报;2010年

5 保健时报特约记者 方序;体外“养”一块软骨补膝盖[N];保健时报;2011年

6 记者 张可喜;培养软骨细胞[N];新华每日电讯;2002年

7 健康时报记者 李海清;软骨破了打“补丁”[N];健康时报;2009年

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4 张e，

本文编号：433949