成年裸鼠与野生型小鼠皮肤形态结构及表皮干细胞标记物分布、表达量的比较研究

发布时间：2017-06-12 03:05

  本文关键词：成年裸鼠与野生型小鼠皮肤形态结构及表皮干细胞标记物分布、表达量的比较研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究背景裸鼠目前是生物医学研究不可或缺的模型鼠,除应用于肿瘤学、毒理学、药品和生物制品安全性评价和帅选的研究中,又因与野生型小鼠相比,存在免疫缺陷,又可以作为移植皮肤的受体,广泛应用于皮肤组织工程学研究中,并可用此模型研究相关皮肤疾病的病因及发生发展。然而对于裸鼠和野生型小鼠皮肤组织学结构的比较,相关的研究较少,因此对裸鼠和野生型小鼠皮肤组织学结构进行细致的研究,并进行比较显得尤为重要。研究目的探讨成年裸鼠与野生型小鼠皮肤形态结构及表皮干细胞标记物分布和表达量的差异。研究方法分别取8只成年裸鼠(Balb/c-nu)与野生型小鼠(昆明小鼠)背部皮肤,经固定、脱水、透明、石蜡包埋后,制成石蜡切片备用。1.苏木精-伊红染色HE染色观察裸鼠和野生型小鼠皮肤表皮、真皮和皮肤附属器的形态结构。2.免疫荧光染色免疫荧光染色观察表皮干细胞标记物p63、β1整合素和角蛋白19在两者皮肤的分布情况。3.免疫组织化学染色免疫组织化学染色测算表皮干细胞标记物β1整合素、p63和角蛋白19的在两者皮肤的表达量及用统计方法分析表达量的差异性。研究结果1.HE染色：低倍镜下裸鼠表皮较野生型小鼠厚,裸鼠表皮光滑,少见突出表皮的毛干,野生型小鼠毛干突出于表皮,排列规则。高倍镜下裸鼠表皮由3-4层上皮细胞组成,而野生型小鼠表皮由1-2层上皮细胞组成,两者在基底细胞和基底上层细胞有形态学差异。裸鼠基底层细胞呈立方形或者柱形,细胞核深染,呈卵圆形,居中,野生型小鼠基底层细胞呈立方形,细胞核圆形深染。裸鼠基底上层细胞有明显的颗粒层,而野生型小鼠没有。裸鼠皮脂腺没有野生型小鼠皮脂腺发达。2.免疫荧光染色：p63表达于裸鼠和野生型小鼠毛囊和基底层细胞的胞核中。β1整合素表达于裸鼠表皮颗粒层和毛囊中及野生型小鼠毛囊中。K19表达于裸鼠和野生型小鼠皮肤毛囊和基底层细胞中。3.免疫组织化学染色：通过图像分析软件Image-Pro Plus 6.0测算MOD值统计分析后发现,裸鼠63、β1整合素和K19的表达量少于野生型小鼠(P0.01)研究结论成年裸鼠和野生型小鼠皮肤表皮、真皮和皮肤附属器结构存在差异,裸鼠表皮比野生型小鼠表皮厚,皮脂腺没有野生型小鼠发达；K19和p63在裸鼠和野生型小鼠皮肤的分布不存在差异,而β1整合素分布存在差异,β1整合素分布在裸鼠毛囊和表皮颗粒层中,而在野生型小鼠中只分布在毛囊；p63、K19和β1整合素在皮肤中的表达量也存在差异,这三种表皮干细胞标记物在裸鼠表皮的表达低于野生型小鼠,具有统计学意义。裸鼠与野生型小鼠皮肤结构及表皮干细胞标记物存在差异,可以作为区别裸鼠与野生型小鼠皮肤的参考。
【关键词】：比较组织学 免疫组织化学 免疫荧光 表皮干细胞
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R-332;R318
【目录】：

• 英文缩略词表6-8
• 中文摘要8-10
• 英文摘要10-13
• 1 引言13-15
• 2 材料与方法15-21
• 2.1 实验动物及标本15
• 2.2 实验主要仪器15-16
• 2.3 实验主要试剂16-17
• 2.4 实验试剂的配制17
• 2.5 HE染色17-19
• 2.6 免疫荧光染色19-20
• 2.7 免疫组织化学染色20-21
• 3 实验结果21-29
• 3.1 HE染色21-24
• 3.2 免疫荧光染色24-26
• 3.3 免疫组织化学染色26-29
• 4 讨论29-35
• 4.1 皮肤的表皮和真皮29-30
• 4.2 皮肤附属器30-31
• 4.3 皮下组织31-32
• 4.4 表皮干细胞标记物的表达32-35
• 5 结论35
• 参考文献35-41
• 个人简介41-42
• 致谢42-44
• 综述44-51
• 参考文献50-51

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 María Eugenia Balaá;Hernán Eduardo Charreau;Gustavo José Leirós;;Epidermal stem cells and skin tissue engineering in hair follicle regeneration[J];World Journal of Stem Cells;2015年04期

2 王溯;陈晓蓉;;成年裸鼠和成人体表皮肤的比较组织形态学研究[J];安徽医科大学学报;2014年08期

3 杜红霞;郑博文;张超;邹勇莉;;p63基因与表皮增殖、发育及肿瘤的研究现状[J];皮肤病与性病;2011年03期

4 李富;付小兵;刘文忠;;人表皮干细胞分离培养和纯化鉴定的进展[J];感染.炎症.修复;2008年04期

5 王锋;王启凤;赵雪萍;;皮肤干细胞的研究进展及其应用[J];中国临床康复;2006年21期

6 吴江声;;皮下组织的结构和功能[J];生物学通报;1988年07期

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本文编号：443078