祛痰化瘀方对PCOS模型大鼠内分泌及卵巢纤维化的影响

发布时间：2017-06-20 22:10

  本文关键词：祛痰化瘀方对PCOS模型大鼠内分泌及卵巢纤维化的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:探索祛痰化瘀方对脱氢表雄酮(Dehydroepiandrosterone,DHEA)诱导的多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)模型大鼠促卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)、卵巢间质TGF-β1表达及颗粒细胞层厚度的影响,探讨祛痰化瘀方治疗多囊卵巢综合征的作用机制,实际是为临床应用祛痰化瘀方治疗多囊卵巢综合征提供理论依据。方法:选取SD雌性大鼠80只,采用随机分组法,分为空白组(22只)与病理模型组(58只)。自22日龄起,持续20天给予病理模型组颈背部皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)6mg/100g体重+0.2ml大豆油混合剂,建立PCOS模型;空白组大鼠每天皮下注射的油剂0.2ml。造模完成后,取空白组、病理模型组各10只大鼠进行模型评估。剩余空白组(12只)及病理模型组(48只)大鼠均进行药物干预实验。病理模型组平均分为祛痰化瘀方高剂量组,祛痰化瘀方低剂量组,二甲双胍组,模型组。空白组、模型组同其体积生理盐水灌胃。祛痰化瘀方高、低剂量组、二甲双胍组根据Bios氏法计算千克体重剂量,计算用药量。连续给药28天后,镜下观察各组大鼠的阴道脱落细胞涂片;当等到每组大鼠均处于同一动情周期的时候,禁食12h,随后以10%的水合氯醛0.3ml/100g进行麻醉,腹主动脉取血,分离血清,-20℃保存,应用ELISA试剂盒检测FSH、LH、T的浓度。剥除大鼠左侧卵巢后称重,迅速放置于已经准备好的4%的多聚甲醛溶液中固定,固定12-24小时,脱水透明后,石蜡包埋,切片,并采用HE染色法染色组织,IPP测量卵泡颗粒细胞层厚度;免疫组化法检测卵巢间质TGF-β1的表达。结果:1.模型评估:(1)动情周期:各组大鼠经过10天的阴道涂片后发现:空白组大鼠动情期以阴道开口日为第一日,并在24小时后进入动情后期,空白组大鼠动情周期规律(4-5天);模型组大鼠的动情周期变化不规律,或者无明显的动情周期。(2)模型组大鼠与空白组大鼠LH水平相比,具有统计学差异,P0.01;空白组FSH与模型组相比有差异,P0.05;血清T水平,模型组与空白组相比较有差异,P0.05。(3)模型组大鼠左侧卵巢重量与空白组相比,P0.05,具有统计学意义。(4)模型组大鼠体重指数(BMI)与空白组相比,P0.05,不具有统计学意义。(5)空白组大鼠卵巢间质TGF-β1表达明显区别于模型组,P0.01,具有统计学意义。模型组大鼠卵巢颗粒细胞层厚度较空白组薄,比较具有统计学意义,P0.05。2.给药后评估:(1)通过对大鼠阴道涂片的观察,空白组大鼠动情周期规律;而模型组的大鼠动情周期紊乱。通过药物干预后,祛痰化瘀高、低剂量组、二甲双胍组大鼠的动情周期基本恢复规律。(2)模型组大鼠血清LH表达程度较正常组明显升高,P0.01,具有显著差异。痰化瘀高剂量组LH水平高于二甲双胍组,对比具有统计学意义,P0.01。祛痰化瘀方低剂量组LH水平与二甲双胍组比较无意义,P0.05;空白组FSH为(2.39±0.60)m IU/ml,模型组为(2.06±0.54)m IU/ml,P0.01,具有显著差异。二甲双胍、祛痰化瘀方高剂量、祛痰化瘀方低剂量对升高多囊卵巢综合征大鼠血清FSH水平均有疗效,具有统计学意义,P0.01。各组大鼠血清T水平与模型组相比均具有统计学意义,P0.05。(3)祛痰化瘀方高剂量、祛痰化瘀方低剂量、二甲双胍组大鼠左侧卵巢重量与模型组相比具有统计学意义P0.01。(4)各组大鼠体重指数经过数据分析显示,空白组、二甲双胍组、祛痰化瘀方低剂量组、祛痰化瘀方高剂量组和模型组间无显著差异,P0.05,不具有统计学意义。(5)卵巢中TGF-β1表达,高剂量组与空白组表达无差异P0.05,中药高剂量组与二甲双胍组比较具有统计学意义P0.05。卵巢颗粒细胞层厚度,高剂量组与空白组比较无统计学差异P0.05,其余各组与之比较均具有统计学意义P0.01。结论:1.祛痰化瘀方通过降低多囊卵巢综合征大鼠LH水平,升高FSH水平,改善多囊卵巢综合征模型大鼠内分泌紊乱情况,从而恢复卵巢功能,促进正常排卵。2.祛痰化瘀方可降低TGF-β1在多囊卵巢综合征大鼠卵巢间质中的表达,降低卵巢纤维化程度。3.祛痰化瘀方能够使多囊卵巢综合征大鼠卵泡颗粒细胞层厚度增厚,促进卵泡生长、成熟及排出。
【关键词】：多囊卵巢综合征 祛痰化瘀方 激素水平 TGF-β1 颗粒细胞层
【学位授予单位】：河南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R285.5;R-332
【目录】：

• 英文缩略语表4-7
• 摘要7-9
• Abstract9-12
• 前言12-14
• 材料与方法14-21
• 1.实验材料14-15
• 1.1 实验动物14
• 1.2 饲料14
• 1.3 实验用药14
• 1.4 主要试剂14-15
• 1.5 主要仪器15
• 2.实验方法15-20
• 2.1 实验动物15
• 2.2 造模方法15
• 2.3 模型动物评估15-19
• 2.4 分组及给药方法19
• 2.5 标本采集与指标检测19-20
• 3.图像分析和统计学处理20-21
• 实验结果21-26
• 1.一般状态观察21
• 2.动物模型评估21-22
• 3.多囊卵巢大鼠给药后评估22-26
• 理论讨论26-34
• 1.PCOS大鼠模型的建立26
• 1.1 DHEA致PCOS大鼠模型的理论基础26
• 1.2 DHEA致PCOS大鼠模型是成熟的模型26
• 2.多囊卵巢综合征的中医认识26-27
• 2.1 古代医家对多囊卵巢综合征的认识26-27
• 2.2 现代中医对多囊卵巢综合征的认识27
• 3.祛痰化瘀方治疗PCOS的理论依据27-29
• 3.1 痰湿血瘀是多囊卵巢综合征的主要病因27-28
• 3.2 祛痰化瘀为治疗多囊卵巢综合征之法28
• 3.3 祛痰化瘀方药物组成及方药分析28-29
• 4.历代医家对单味中药的认识及药理研究29-32
• 5.祛痰化瘀方对PCOS大鼠模型激素水平的影响和降低卵巢纤维化作用的探讨32-33
• 5.1 祛痰化瘀方对PCOS大鼠模型激素水平的影响32-33
• 5.2 祛痰化瘀方对PCOS模型大鼠降低卵巢纤维化和颗粒细胞层厚度的影响33
• 6.本研究的创新和不足之处33-34
• 6.1 实验特点33
• 6.2 不足之处33-34
• 结论34-35
• 致谢35-36
• 参考文献36-39
• 附录1 阴道脱落细胞涂片39-40
• 附录2 文献研究40-47
• 参考文献45-47
• 附录3 在校期间论文论著情况47

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本文编号：467020