T细胞通过产生IFN-γ参与单核细胞增生李斯特菌感染免疫

发布时间：2017-06-21 12:13

  本文关键词：T细胞通过产生IFN-γ参与单核细胞增生李斯特菌感染免疫，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,Lm)是一种革兰阳性兼性厌氧菌,人体感染后一般表现为发热、胃肠炎,但婴幼儿、老年人以及免疫力低下人群感染后较为严重,可表现为败血症、脑膜炎和单核细胞极度增生等。该菌在4℃的环境中仍可生长繁殖,是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一。干扰素γ(IFN-γ)主要由活化的T细胞和DC细胞产生,它在胞内菌感染中起到保护作用。在单核细胞增生李斯特氏菌感染的小鼠中,T细胞可通过分泌大量的IFN-γ抑制细菌载量,IFN-γ可进一步活化单核巨噬细胞、NK细胞等参与细菌清除。国内外关于IFN-γ在人体感染单核细胞增生李斯特氏菌的作用较少报道,本课题拟以健康体检者为对照,采用ELISA法检测患者与健康对照者外周血血清IFN-γ含量,采用q-PCR的方法检测外周血单个核细胞IFN-γmRNA含量,采用流式细胞术的方法检测分泌IFN-γ的T细胞比例,探索T细胞能否通过IFN-γ参与单核细胞增生李斯特氏菌感染后的免疫。目的本课题拟以健康体检者为对照,检测外周血IFN-γmRNA及蛋白表达,同时检测IFN-γ~+CD4~+T细胞比例,探索T细胞能否通过分泌IFN-γ参与单核细胞增生李斯特氏菌感染后免疫,为机体抗Lm感染免疫机制和减毒Lm的临床应用提供初步理论依据。方法1.研究对象:2013年5月-2015年5月于驻马店市中心医院感染科确诊为Lm感染者纳入Lm组,同期体检科健康体检者纳入HC对照组。2.样本收集和处理:收集Lm患者和HC对照者空腹血样10ml,以肝素锂抗凝,分离血浆冻存,并采用Ficoll分离法分离外周血单个核细胞,备用。3.血浆IFN-γ水平的检测:采用人IFN-γELISA检测试剂盒,检测血浆IFN-γ含量。4.IFN-γmRNA的检测:提取Lm患者和HC对照者外周血单个核细胞总RNA,经逆转录后,采用实时荧光定量PCR检测IFN-γmRNA的表达情况。5.IFN-γ~+CD4~+T细胞比例检测:采用多色荧光抗体结合流式细胞术检测并分析样本中IFN-γ~+CD4~+T细胞比例。6.统计学方法:计量数据以均数加减标准差(喁±s)表示,两组间差异比较采用t检验,各组数据阳性率比较采用卡方检验。检验水准α=0.05,P0.05为差异有统计学意。结果1.标本分组情况:Lm组共计16例,HC组共计20例,性别、年龄无统计学差异。2.酶联免疫法ELISA检测结果:Lm组血浆IFN-γ含量为(7.26±4.99)pg/ml,高于HC组血浆IFN-γ含量(3.21±1.22)pg/ml,且有显著统计学差异。3.荧光定量PCR检测结果:Lm组外周血单个核细胞IFN-γmRNA相对表达量(118.15±34.35)倍,健康对照组为(99.24±19.46)倍,前者高于后者且结果有显著统计学差异。4.流式细胞术结果:Lm组IFN-γ~+CD4~+T细胞比例为(8.61±5.22)%,HC组IFN-γ~+CD4~+T细胞比例为(5.76±1.23)%,前者高于后者且有统计学差异。结论1.Lm感染患者外周血IFN-γmRNA及蛋白表达均高于健康对照者;2.Lm感染患者外周血IFN-γ~+CD4~+T细胞比例增加,即T细胞可通过高表达IFN-γ参与Lm感染。
【关键词】：单核细胞增生李斯特氏菌 T细胞 γ干扰素 感染免疫
【学位授予单位】：新乡医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R378
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-12
• 1 材料和方法12-22
• 2 结果22-26
• 3 讨论26-28
• 4 小结28-29
• 参考文献29-31
• 综述 细胞自主应答在单核细胞增生性李斯特菌感染中的作用31-38
• 参考文献35-38
• 附录 缩写词中英文对照38-39
• 在攻读学位期间发表的文章39-40
• 致谢40-41
• 个人简历41

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本文编号：468633