来航鸡FOXL2蛋白单克隆抗体的制备

发布时间：2017-06-25 01:12

  本文关键词：来航鸡FOXL2蛋白单克隆抗体的制备，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:制备来航鸡FOXL2蛋白的单克隆抗体。方法:利用生物信息学的方法分别预测来航鸡FOXL2蛋白最有可能的线性表位,并人工合成多肽,高效液相色谱分析其纯度,与KLH偶联后免疫小鼠制备其单克隆抗体,用间接ELISA方法和免疫印迹进行筛选,然后对筛选出来的细胞株进行一般性质测定、亲和常数测定、IC50测定。结果:合成多肽纯度95%,细胞融合后,其平均融合率为75%,并用间接ELISA方法和Western blot筛选出1条可与FOXL2蛋白发生明显反应的细胞株C2;经测定,C2细胞株上清效价为1/128,腹水效价为1/256,其亚型属于IgG1,杂交瘤细胞染色体为102条,腹水单抗的蛋白含量为1.576 g/L,其亲和常数为2.12×106L/mol,IC50值为0.082 47μg/L。结论:成功制备了FOXL2蛋白单克隆抗体,为下一步深入研究FOXL2蛋白奠定基础。
【作者单位】： 河南科技学院动物科学院;河南科技学院新科学院;新乡医学院实验动物中心;
【关键词】： 来航鸡 FOXL 单克隆抗体 表位
【分类号】：R392
【正文快照】： FOXL2基因(winged helix/forkhead transcriptionfactor gene 2,FOXL2)属Fox超家族成员。据研究,FOXL2基因不但与人类BPES、POF、颗粒细胞瘤等诸多疾病的发生有关[1-4],还被认为在动物性别决定、性别反转、卵巢发育、维持动物第二性征等方面发挥着重要作用[5-7]。2002年,Fuhre

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 徐萍;李任峰;赵坤;王三虎;何宏轩;鲁毅;;来航鸡FOXL2基因的克隆与序列分析[J];黑龙江畜牧兽医;2012年09期

2 罗军荣;斯日古楞;刘霄卉;周建华;马学恩;;JSRV衣壳蛋白单克隆抗体的制备及免疫学鉴定[J];生物化学与生物物理进展;2009年01期

3 鲁毅;李任峰;徐萍;李学斌;王三虎;;来航鸡FOXL2蛋白的生物信息学分析[J];生物技术;2012年02期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 王金良;沈志强;刘吉山;张文杰;;德克赛尔杂交绵羊肺腺瘤的诊断[J];动物医学进展;2011年04期

2 ;Some latest achievements in immunology research[J];Chinese Science Bulletin;2011年35期

3 王金良;李娇;沈志强;张文杰;;绵羊肺腺瘤病毒套式RT-PCR检测方法的建立[J];中国兽医科学;2010年09期

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 吴慧英;刘铀;贾汝敏;张丽;;四川白鹅PRL基因的克隆与生物信息学分析[J];华北农学报;2011年01期

2 李武修;孙岩;;Forkhead转录因子超家族成员——FOXL2[J];口腔医学研究;2006年02期

3 徐飞;成述儒;罗玉柱;;绵羊DRB1基因生物信息学分析[J];生物技术通报;2011年01期

4 徐飞;成述儒;罗玉柱;;奶牛DRB3基因生物信息学分析[J];中国奶牛;2011年02期

5 斯日古楞;么宏强;马学恩;王升启;;绵羊肺腺瘤病病毒NM株衣壳蛋白基因的克隆与原核表达[J];中国预防兽医学报;2007年08期

中国硕士学位论文全文数据库 前2条

1 纪滨;H5N1亚型禽流感病HA蛋白抗原表位预测与筛选[D];吉林大学;2009年

2 徐超;牛SOX9基因的克隆及早期胎儿性别相关基因的表达分析[D];中国农业科学院;2010年

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李桂新;孙长凯;程桂芝;罗建红;李芳;;应用噬菌体肽库筛选NMDA受体抗原表位[J];河北医药;2006年05期

2 马翠卿;顾海燕;郭奕阳;胡光磊;魏澎;魏林;;A族链球菌表面蛋白Fba单克隆抗体的制备及其对应表位的初步鉴定[J];中国免疫学杂志;2008年11期

3 张红梅;戴星;孟继鸿;赵宇;单祥年;;戊型肝炎病毒第4基因型中国株ORF2编码蛋白的抗原表位分析[J];遗传;2007年05期

4 吴媛;潘卫庆;;竞争ELISA法分析恶性疟原虫单克隆抗体的识别表位[J];中国热带医学;2010年08期

5 郭奕阳;马翠卿;魏澎;王秀荣;冯惠东;阎婉依;魏林;;A族链球菌(GAS)Fba蛋白单克隆抗体对应表位核心氨基酸的确定[J];中国免疫学杂志;2009年12期

6 杨明珍;李鹏;张竹君;易维京;李淑慧;赵利军;胡川闽;;抗淋巴样增强因子-1羧基端单克隆抗体的制备及其表位的初步鉴定[J];免疫学杂志;2008年02期

7 杨海燕;李妍;宁云山;董文其;李明;;从噬菌体随机肽库中筛选SARS病毒N蛋白表位模拟肽的研究[J];热带医学杂志;2006年02期

8 Hughes-JonesNC;夏齐全;;单克隆抗体是一种有希望的血型鉴定试剂[J];国际输血及血液学杂志;1988年05期

9 章子豪;;传播阻断性单克隆抗体的靶抗原——恶性疟原虫不同分离物配子的Pfs48/45表位的特性[J];国际医学寄生虫病杂志;1991年06期

10 杨海燕;陈光明;李明;董文其;宁云山;杨富强;;利用噬菌体肽库技术筛选SARS病毒N蛋白表位模拟肽[J];广东医学;2008年07期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 华荣虹;周艳君;王云峰;华玉卓;童光志;;SARS冠状病毒S蛋白抗原表位的分析研究[A];中国畜牧兽医学会2004学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集（下册）[C];2004年

2 马翠卿;郭奕阳;顾海燕;曾瑞红;杨丽娟;魏林;;一株抗A族链球菌表面蛋白Fba的单克隆抗体对应的表位与Fba结合调节蛋白FH的位点重叠[A];河北省免疫学会第六次免疫学大会资料汇编[C];2010年

3 刘莉;高媛;鞠艳芳;杨金菊;何湘;吴琼;李戬;宋颖博;陈勇;杜雪梅;徐菡;柳晓兰;高建恩;孙启鸿;;单克隆抗体识别PDC-E2表位的鉴定[A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2005年

4 陶薇;杨连华;何卓晶;洪艳;陈勇;;抗戊型肝炎病毒重组蛋白单克隆抗体的制备和鉴定[A];浙江省医学会医学微生物与免疫学及医学病毒学学术年会论文汇编[C];2009年

5 李丹丹;张小莺;;猪戊型肝炎病毒重组蛋白ORF2-V1单克隆抗体的制备及抗原表位差异分析[A];全国第十一届生化与分子药理学学术会议论文集[C];2009年

6 夏立新;Robotham Teuber Sathe Roux;;利用单克隆抗体鉴定腰果主要过敏原Ana o 2的一个IgE立体抗原表位[A];中华医学会2009年全国变态反应学术会议论文汇编[C];2009年

7 杜雪梅;唐丽;任飞W

本文编号：480236