特异性标记胚胎干细胞分化的成血管细胞
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【摘要】:克隆小鼠flk1基因启动子和增强子,构建成血管细胞特异性表达GFP载体,并转染小鼠胚胎干细胞(ES)。将ES分化形成胚胎体(EB),观察EB中GFP表达,收集第4天的EB细胞进行流式细胞分析和分选,以获得GFP+细胞进行血细胞集落形成实验,以确定GFP标记细胞造血分化潜能。结果显示,成功构建成血管细胞特异性表达GFP载体;转染的ES形成的EB中可见绿色荧光细胞。流式细胞分析结果发现,转基因组EB中的GFP+细胞(27.5%)与对照组EB中FLK1+细胞(28.1%)比较差异无统计学意义;GFP+和FLK1+细胞形成集落数比较差异无统计学意义。表明对ES分化产生的成血管细胞实现了特异性标记,为后续研究ES体外造血分化的分子机制奠定了基础。
【作者单位】: 安徽医科大学附属省立医院儿科;安徽医科大学第一临床学院;安徽医科大学第二附属医院血液科;安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室;
【关键词】: 胚胎干细胞 成血管细胞 造血细胞 细胞分化 细胞标记
【基金】:国家自然科学基金(编号:81172591) 安徽省教育厅课题(编号:KJ20108372) 安徽医科大学博士学术科研活动资助项目(编号:XJ200801)
【分类号】:R329
【正文快照】: 小鼠胚胎干细胞(murine embryonic stem cells,ES)最早由Evans以及Martin分别从小鼠早期胚胎中成功分离、培养并建立的细胞系[1]。利用ES的多能性特点,常采用ES体内、体外分化实验等方法研究ES细胞分向内、中、外等胚层细胞分化。ES在体外诱导分化造血细胞过程中将经历中胚层
【参考文献】
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【共引文献】
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【相似文献】
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