当前位置:主页 > 医学论文 > 基础医学论文 >

带myc标签的人HER2基因真核表达载体的构建及其生物学功能

发布时间:2017-06-29 13:19

  本文关键词:带myc标签的人HER2基因真核表达载体的构建及其生物学功能,由笔耕文化传播整理发布。


【摘要】:目的构建人类HER2基因的真核表达载体,并对其促进乳腺癌细胞增殖效果及靶向药物敏感性进行验证。方法采用PCR技术扩增出HER2基因,将其插入到pXJ-40-myc载体中,酶切和测序验证后,将其转染到乳腺癌ZR75-1细胞中,Western blot法检测其表达情况;CCK8法测定细胞生长曲线;加入靶向药物曲妥珠单克隆抗体后,观察转染细胞对药物的反应。结果酶切和测序结果证实表达质粒构建成功;Western blot法结果显示,myc-HER2蛋白在转染细胞中成功表达;转染myc-HER2的乳腺癌细胞较空载体细胞生长较快;加入曲妥珠单克隆抗体后,转染myc-HER2的细胞生长明显受到抑制。结论成功构建了带myc标签的HER2基因真核表达载体,为进一步研究曲妥珠单抗的耐药奠定了实验基础。
【作者单位】: 解放军医学院;军事医学科学院附属医院乳腺肿瘤科;军事医学科学院生物工程研究所;
【关键词】HER myc ZR-乳腺癌细胞
【基金】:国家高技术研究发展计划(863)(2006AA02A246) 北京市自然科学基金(7132155) 国家自然科学基金(31100604)
【分类号】:R392-33
【正文快照】: 人类表皮生长因子受体2(human epidermalgrowth factor receptor-2,HER2)基因定位于人染色体17q21,编码的蛋白相对分子质量(Mr)约为185 000。研究表明[1-2],HER2基因过表达的乳腺癌患者,具有恶性程度高、预后差的特点。曲妥珠单克隆抗体(trastuzumab)作为第一个用于抗HER2的

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 边莉;江泽飞;;曲妥珠单抗原发耐药与继发耐药的研究进展[J];临床肿瘤学杂志;2012年06期

2 程联胜;查昭;席甲甲;江冰;刘兢;姚雪彪;;腺病毒介导的RNA干涉对乳腺癌SKBR3细胞HER2的下调及生长抑制效应[J];细胞与分子免疫学杂志;2007年08期

3 蒋凯;杨智洪;王朝云;徐小洁;程龙;张浩;韩永健;叶棋浓;;siRNA抑制ErbB2基因的表达及对乳腺癌细胞生长的影响[J];细胞与分子免疫学杂志;2011年03期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 唐三元;黄卫国;伍尤华;戴文香;江青山;;HER2/neu和GM-CSF共转染树突状细胞的免疫杀伤研究[J];细胞与分子免疫学杂志;2008年01期

2 王丽娟;赵悦;肖华卫;白娥;董超;杨韬;杨安钢;朱青;;HER2高表达的人乳腺癌原代细胞模型的建立[J];细胞与分子免疫学杂志;2011年10期

3 卞隽;熊文激;尚立华;;P53和siRNA-c-myc质粒对乳腺癌细胞生物学特性影响的研究[J];中国医药指南;2012年34期

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 江泽飞;边莉;;乳腺癌表皮生长因子受体-2分子靶向治疗临床应用策略[J];中华普外科手术学杂志(电子版);2011年04期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王凯;温伟红;王涛;张瑞;秦炜炜;雷小英;杨安钢;;人源抗HER2单链抗体/轻链恒定区/鱼精蛋白截短体融合蛋白的基因构建、表达及活性鉴定[J];第四军医大学学报;2007年07期

2 高洋;杨红;闫岩;刘艳丽;张芳琳;吴兴安;辛晓燕;;腺病毒介导的Her2基因RNAi载体的构建和鉴定[J];现代生物医学进展;2008年08期

3 刘红芹;王冬梅;屈浩;石琳;黄丽华;冯春玲;张丽艳;朱卫彬;;特异性HER2单克隆抗体的制备及初步应用[J];细胞与分子免疫学杂志;2010年05期

4 李贺;向泽敏;吴秀丽;王莉;卫红飞;万敏;王丽颖;于永利;;体内稳定表达HER2多表位基因B16细胞系的建立[J];细胞与分子免疫学杂志;2009年01期

5 王宣军,向泽敏,包木胜,王丽颖,于永利;高效价特异性HER2ME抗体的制备及鉴定[J];中国生物制品学杂志;2005年01期

6 张敏;抗HER2单克隆抗体研究新进展[J];国外医学.生理.病理科学与临床分册;2003年03期

7 隋文君;李红智;郑易;谢丽微;林鹏;;Herceptin下调HER2表达后对PI3K/Akt通路蛋白表达的影响[J];温州医学院学报;2008年03期

8 徐腾飞;张文卿;于红;李丹;;重组HER2真核表达载体的构建及其稳定转染EMT6细胞株的筛选[J];细胞与分子免疫学杂志;2009年03期

9 李晓华,秦慧莲,何球藻;原癌基因HER2/neu表达产物p185蛋白免疫原性研究[J];中国免疫学杂志;1998年03期

10 方路,吴玉章;HER2/neu动物模型的建立和免疫学鉴定[J];第三军医大学学报;2003年13期

中国重要会议论文全文数据库 前2条

1 ;Effects of Hexamethylene Bisacetamide on Proliferation and Gene Expression of Human Hepatocarcinoma Cells[A];第十三届中国科协年会第6分会场-绿色经济与沿海城市可持续发展战略研讨会论文集[C];2011年

2 欧田苗;谭嘉恒;古练权;黄志纾;;G-四链体在基因转录中的调控作用及其机制研究[A];2011年全国药物化学学术会议——药物的源头创新论文摘要集[C];2011年

中国重要报纸全文数据库 前3条

1 记者 李天舒;HER2抗体新免疫机制被发现[N];健康报;2010年

2 记者 白毅;HER2抗体抗肿瘤效应免疫新机制被发现[N];中国医药报;2010年

3 田学科;以科学家发现治疗癌症新方法[N];科技日报;2005年

中国博士学位论文全文数据库 前8条

1 方晨;Her2全人源抗体的制备及生物学功能研究[D];第二军医大学;2011年

2 王宣军;BCG热休克蛋白65-HER2多表位融合蛋白[D];吉林大学;2003年

3 向泽敏;热休克蛋白65-HER2多表位融合蛋白的构建及其生物学功能研究[D];吉林大学;2006年

4 常亮;基于计算模拟的抗Her2抗体A21的亲和力及人源化改造[D];中国科学技术大学;2010年

5 张健;Myc调控人NDRG1和NDRG2的机制研究[D];第四军医大学;2006年

6 解志刚;基因工程抗HER2/neu ×抗CD16双特异性抗体的构建、表达及其功能的初步研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年

7 尹德龙;表皮干细胞在不同外界因素下对其生物学特性的影响及机制研究[D];华中科技大学;2012年

8 江鑫;酪氨酸磷酸酶SHP2在IL-6诱导的GC源性B-NHL细胞重分化中的研究[D];浙江大学;2012年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 刘香娟;非p53依赖通路c-myc基因调控p14~(ARF)基因表达及诱导细胞凋亡的研究[D];青岛大学;2012年

2 邱壮伟;靶向HER2的人β防御素2的表达纯化及体外活性研究[D];暨南大学;2012年

3 王明丽;异种抗原neu-Fc联合GM-CSF/IFN-γ和BCG的抗肿瘤免疫效应[D];河南大学;2008年

4 曹宏;Erbin介导Her2与β2-AR相互作用及参与MAPK信号通路调控的探讨[D];河北医科大学;2011年

5 赵明珍;Erbin在β2-AR介导 MAPK信号通路中的调控作用及生物学功能的研究[D];河南大学;2012年

6 马晶莹;sEGFP-CD40L融合基因表达载体的构建、表达及功能鉴定[D];第三军医大学;2010年

7 陈立勇;增强基因工程抗体表达策略的初步探讨[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年

8 张亚楠;GATA-4基因促进5-氮杂胞苷诱导的骨髓间充质干细胞向心肌分化[D];河北医科大学;2011年

9 庞云;人脐带胶质间充质干细胞的分离培养与特性研究[D];内蒙古农业大学;2011年

10 丁玉龙;Wnt2b/β-catenin/c-myc信号途径在小鼠胚胎心脏中的时空表达[D];桂林医学院;2011年


  本文关键词:带myc标签的人HER2基因真核表达载体的构建及其生物学功能,,由笔耕文化传播整理发布。



本文编号:498070

资料下载
论文发表

本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/jichuyixue/498070.html


Copyright(c)文论论文网All Rights Reserved | 网站地图 |

版权申明:资料由用户290dd***提供,本站仅收录摘要或目录,作者需要删除请E-mail邮箱bigeng88@qq.com