带myc标签的人HER2基因真核表达载体的构建及其生物学功能
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【摘要】:目的构建人类HER2基因的真核表达载体,并对其促进乳腺癌细胞增殖效果及靶向药物敏感性进行验证。方法采用PCR技术扩增出HER2基因,将其插入到pXJ-40-myc载体中,酶切和测序验证后,将其转染到乳腺癌ZR75-1细胞中,Western blot法检测其表达情况;CCK8法测定细胞生长曲线;加入靶向药物曲妥珠单克隆抗体后,观察转染细胞对药物的反应。结果酶切和测序结果证实表达质粒构建成功;Western blot法结果显示,myc-HER2蛋白在转染细胞中成功表达;转染myc-HER2的乳腺癌细胞较空载体细胞生长较快;加入曲妥珠单克隆抗体后,转染myc-HER2的细胞生长明显受到抑制。结论成功构建了带myc标签的HER2基因真核表达载体,为进一步研究曲妥珠单抗的耐药奠定了实验基础。
【作者单位】: 解放军医学院;军事医学科学院附属医院乳腺肿瘤科;军事医学科学院生物工程研究所;
【关键词】: HER myc ZR-乳腺癌细胞
【基金】:国家高技术研究发展计划(863)(2006AA02A246) 北京市自然科学基金(7132155) 国家自然科学基金(31100604)
【分类号】:R392-33
【正文快照】: 人类表皮生长因子受体2(human epidermalgrowth factor receptor-2,HER2)基因定位于人染色体17q21,编码的蛋白相对分子质量(Mr)约为185 000。研究表明[1-2],HER2基因过表达的乳腺癌患者,具有恶性程度高、预后差的特点。曲妥珠单克隆抗体(trastuzumab)作为第一个用于抗HER2的
【参考文献】
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【二级参考文献】
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【相似文献】
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本文编号:498070
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