大鼠表皮基底层干细胞体外分离与培养

发布时间：2017-07-04 23:00

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【摘要】：目的建立简单、可靠的大鼠表皮基底层干细胞体外分离培养方法。方法取新生大鼠背部皮肤,采用胰酶两步消化法获得单细胞悬液,Ⅳ型胶原差速贴壁法富集干细胞,将慢黏附细胞作为对照组细胞,均以角质形成细胞无血清培养基培养。以β1-整合素和角蛋白19(K19)双重荧光染色鉴定细胞表型,克隆形成实验检测细胞体外增殖能力。结果分离培养的细胞为多角形、呈铺路石样排列,倍增时间约为24h,细胞形态和生长规律符合基底层干细胞的特征。免疫荧光鉴定显示细胞共表达β1-整合素和K19,基底层干细胞克隆形成能力显著强于对照细胞。结论两步消化联合Ⅳ型胶原差速贴壁法获取基底层干细胞简易可行,培养的细胞活力好、表型可靠。
【作者单位】： 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室/全军交通医学研究所/创伤烧伤与复合伤国家重点实验室;
【关键词】： 成体干细胞 细胞培养技术 表皮干细胞 基底层干细胞
【基金】：国家自然科学基金重点项目(81030037)
【分类号】：R329
【正文快照】： 表皮干细胞作为一种成体干细胞,是表皮和皮肤附属器的种子细胞,具有强大的增殖能力和定向分化潜能。表皮干细胞移植疗法为大面积皮肤缺损、难愈性溃疡以及脱发等病患带来福音,在再生医学领域具有广阔的应用前景。尽管近年来表皮干细胞逐渐成为再生医学研究热点,但研究水平尚

【参考文献】

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【相似文献】

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