转化生长因子-β不同亚型对前软骨干细胞增殖分化的影响

发布时间：2017-07-15 12:22

  本文关键词：转化生长因子-β不同亚型对前软骨干细胞增殖分化的影响

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【摘要】：目的通过观察转化生长因子-β(TGF-β)3种不同亚型(β1、β2和β3)对前软骨干细胞(PSCs)的增殖分化及细胞外基质合成的影响,为构建组织工程学软骨组织寻找理想的细胞因子。方法通过免疫磁珠分选法得到经过筛选和纯化的PSCs细胞,分别用含有浓度为10ng/mL的3种亚型的重组TGF-β培养液对PSCs进行培养。PSCs培养后第0、3、6、9天,采用MTT法与BrdU/PI双参法测细胞增殖及DNA合成水平,采用RT-PCR法测定ColⅡ、Aggrecan基因的表达。采用免疫组化法测定培养2周后各组细胞SOX9蛋白表达情况。结果培养3d后,TGF-β1组PSCs的增殖活性明显较对照组下降(P0.05),而TGF-β2、TGF-β3组增殖活性与对照组相比差异无统计学意义(P0.05)。6d后,与对照组相比,TGF-β1组细胞增殖活性明显降低(P0.05);而TGF-β2、TGF-β3组则显示了相反的结果,增殖活性较对照组明显增强,且TGF-β3组高于TGF-β2组(P0.05)。DNA合成呈同样趋势。RT-PCR分析显示,随着时间的延长,与对照组相比,TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3组ColⅡ基因表达均呈上升趋势;TGF-β1与TGF-β3组Aggrecan的表达亦较对照组增加,但TGF-β2组Aggrecan的基因表达无明显改变。免疫组化检测结果显示,TGF-β1、TGF-β3组的SOX9蛋白合成高于对照组(P0.05),而TGF-β2组与对照组相比差异无统计学意义(P0.05)。结论 TGF-β1能抑制PSCs增殖活性,而TGF-β2和TGF-β3具有促进PSCs增殖的作用,TGF-β1与TGF-β3均能促进PSCs细胞分化,而TGF-β2对于分化的诱导作用不明显。
【作者单位】： 广州军区武汉总医院骨科;
【关键词】： 前软骨干细胞 转化生长因子-β 增殖 分化
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 软骨自我修复能力极为有限,尽管传统的手术治疗可以起到一定修复作用,但实际上髓腔及血液中的成软骨细胞无法到达损伤部位,进而增殖分化形成具有一定强度的软骨组织[1],最终损伤部位将为纤维疤痕组织所替代,无法恢复关节正常的生理构造和功能。故软骨损伤的治疗一直困扰着临

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本文编号：543858