人成纤维细胞生长因子-21单克隆抗体的制备及抗原表位的确定

发布时间：2017-07-15 11:22

  本文关键词：人成纤维细胞生长因子-21单克隆抗体的制备及抗原表位的确定

  更多相关文章： 人成纤维细胞生长因子- 单克隆抗体 细菌展示 流式细胞术

【摘要】：目的制备小鼠抗人成纤维细胞生长因子(hFGF)-21单克隆抗体(mAb),通过细菌展示确定该mAb的抗原表位。方法用hFGF-21作为检测和免疫抗原,间接ELISA筛选分泌抗人hFGF-21 mAb的杂交瘤细胞株;用FITC标记该mAb,并克隆hFGF-21的不同片段到展示载体Apex上,通过流式细胞仪筛选其抗原表位。结果成功筛选出1株抗hFGF-21抗体的细胞株,其分泌抗体重链的亚型为IgG 2b,轻链为Kappa链;该杂交瘤细胞株腹水的效价为1∶4.096×106;传30代及液氮中保存3个月,该细胞株能稳定分泌抗hFGF-21 mAb,且效价稳定;Western blot法检测证明该抗体与人FGF-21有很好的特异性;该mAb与小鼠FGF-21有交叉反应;通过流式细胞仪对抗原表位的筛选,该mAb可与hFGF-21下游的第107~121个氨基酸反应。结论成功的制备出特异性、高稳定性的小鼠抗hFGF-21 mAb,确定了该mAb的抗原表位在第107~121位氨基酸。
【作者单位】： 东北农业大学生命科学学院生物制药教研室;
【关键词】： 人成纤维细胞生长因子- 单克隆抗体 细菌展示 流式细胞术
【基金】：东北农业大学博士启动基金(2010RCB52)
【分类号】：R392.12
【正文快照】： 成纤维细胞生长因子-21(fibroblast growth factor-21,FGF-21)是成纤维细胞生长因子家族的一名新成员,具有降低血糖、降低甘油三酯、升高高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)、降低低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)等功能,并且可以维持人体血糖稳定,避免高

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 尹成凯;徐黎明;任桂萍;张巧;刘向宇;田辉;李德山;;酵母展示筛选scFv方法的建立[J];细胞与分子免疫学杂志;2009年12期

2 徐黎明;尹成凯;任桂萍;田辉;王雪琴;丁良君;李德山;;筛选Fab抗体库的细菌展示技术的建立[J];细胞与分子免疫学杂志;2011年10期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 徐嘉妤;敖娜;都健;赵晓娟;;成纤维细胞生长因子21与非酒精性脂肪性肝病[J];国际消化病杂志;2013年06期

2 徐黎明;尹成凯;任桂萍;田辉;王雪琴;丁良君;李德山;;筛选Fab抗体库的细菌展示技术的建立[J];细胞与分子免疫学杂志;2011年10期

3 徐黎明;任桂萍;尹杰超;田辉;李德山;;基于流式细胞术的scFv抗体库筛选技术的建立[J];细胞与分子免疫学杂志;2013年01期

4 徐黎明;郭茉;任桂萍;尹杰超;李德山;;基于抗原-抗体共表达的细菌展示技术的优化[J];细胞与分子免疫学杂志;2013年04期

5 付坤;柳景华;;成纤维细胞生长因子21:从生理作用到临床研究[J];中国循环杂志;2014年04期

6 张晶;付洁;宋海峰;;真核表达系统的抗体库技术研究进展[J];细胞与分子免疫学杂志;2014年08期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 张晶;哺乳动物细胞展示型人源ScFv抗体库构建及靶向ErbB3 ScFv筛选[D];安徽医科大学;2014年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

1 贾帅争;真核蛋白表面展示系统[J];国外医学(分子生物学分册);2000年01期

2 贾帅争,孙红琰,王全立;酵母表面展示技术及应用[J];军事医学科学院院刊;2001年02期

3 郭波,谢佩蓉,邹强,郑萍;酵母表面展示系统研究进展[J];生物化学与生物物理进展;2002年01期

4 贾帅争,孙红琰,刘晓达,杜芝燕,杜勇,王全立,章扬培;HCVNS3基因片段酵母展示文库的构建和鉴定[J];中国生物化学与分子生物学报;2001年01期

5 刘向昕,展德文,张兆山;细菌表面展示技术的应用研究进展[J];微生物学免疫学进展;2005年02期

6 郭波,郑萍,谢佩蓉,吴玉章,邹强;酵母细胞表面展示的hDAF对补体在酵母细胞表面沉积的抑制作用[J];细胞与分子免疫学杂志;2004年03期

7 尹成凯;徐黎明;任桂萍;张巧;刘向宇;田辉;李德山;;酵母展示筛选scFv方法的建立[J];细胞与分子免疫学杂志;2009年12期

8 钟彦伟,成军,施双双,夏小兵,李克,董菁,刘妍,杨继珍;抗HBsAg人源单链可变区抗体的筛选与可溶性抗体的表达[J];中国病毒学;2001年02期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 马丽娜;刘永生;陈豪泰;孙德惠;张杰;;Asia1型口蹄疫抗原位点研究进展[J];中国人兽共患病学报;2008年12期

2 逯好英,徐东刚,肖定华,潘和平,王春杰;HCVC 蛋白基因在 E . coli 中的表达及其抗原表位分析[J];军事医学科学院院刊;1997年03期

3 李芳秋,严明,武建国;亲环素A抗原表位氨基酸序列及三维结构研究[J];医学研究生学报;2001年03期

4 柯\~,戚中田,温新宇,施明,赵平,沈倍奋;从随机9肽库中筛选HCV抗原表位[J];中国免疫学杂志;2002年12期

5 罗勇 ,陈受霓;植物细胞工厂和粘膜疫苗[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;2004年04期

6 夏明灿,林怡,熊思东,储以微;MUC1肿瘤抗原表位PDTRP基因免疫诱导的体内外抗瘤效应[J];中国肿瘤生物治疗杂志;2004年03期

7 胡族琼,赵卫,龙北国,江丽芳,郭新雄;SARS冠状病毒M蛋白二级结构和B细胞抗原表位的稳定性分析[J];广东医学;2005年05期

8 田旺 ,李正赫 ,曹学琳 ,杨文博 ,白钢;应用噬菌体随机肽库技术研究干扰素-α2b抗原表位[J];中华微生物学和免疫学杂志;2005年07期

9 关琪;王素芬;张卓然;成保平;吴薇;;B′亚型人类免疫缺陷病毒的基因序列分析[J];中国微生态学杂志;2005年06期

10 王晓红;卢海蓉;章刚;陈少娟;黄德新;李凌云;林枫;;单纯疱疹病毒II型糖蛋白G主要抗原表位的表达和抗原性检测[J];中国生物工程杂志;2007年09期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 胡晓林;;B细胞抗原表位研究进展[A];天津市核学会2005年学术交流会论文汇编[C];2005年

2 周宇;王永山;范红结;欧阳伟;唐雨德;王忠灿;;IBDV抗原表位与VP2组合基因的分子构建及其在昆虫细胞中的表达[A];第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛论文集（下册）[C];2010年

3 李玉娇;王晶;赵慧;贾海英;李博;马秀敏;温浩;丁剑冰;;细粒棘球绦虫Eg95抗原表位的二级结构和表位预测[A];2011新型疫苗与抗体创制关键技术及质量控制研讨会论文集[C];2011年

4 黄革;王德斌;郭黎平;赵念玺;李媛媛;陆士新;;食管癌相关基因2(ECRG2)多肽C末端抗原表位在E.coli和COS-7细胞中的表达分析[A];科技、工程与经济社会协调发展——中国科协第五届青年学术年会论文集[C];2004年

5 王进荣;杨利国;;人卵泡抑制素α亚基抗原表位的预测[A];第四届中国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2001年

6 陈书明;张秋伟;曹瑞兵;陈溥言;;鸡肾型传染性支气管炎病毒S1抗原表位富集区在毕赤酵母中的表达[A];全国动物生理生化第十次学术交流会论文摘要汇编[C];2008年

7 林祥梅;邓俊花;李雅静;吴绍强;;南非Ⅱ型口蹄疫抗原表位筛选、表达及ELISA检测方法研究[A];动物检疫学分会2010年学术年会论文集[C];2010年

8 李越希;陶开华;张锦海;黄培堂;;SARS病毒的S蛋白和N蛋白抗原表位的分析、基因合成、表达纯化及鉴定[A];科技、工程与经济社会协调发展——中国科协第五届青年学术年会论文集[C];2004年

9 王凌;闭兰;张爱华;;用噬菌体随机7肽库筛选WuT4单抗人CD4 B细胞抗原表位[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年

10 张兴梅;刘刚;孙曼霁;;应用组合化学新技术研究人脑乙酰胆碱酯酶的抗原表位[A];第七届全国生化药理学术讨论会论文摘要集[C];2000年

中国重要报纸全文数据库 前6条

1 陆志城;为AD疫苗研发带来新希望[N];医药经济报;2002年

2 肖鑫 朱晓军;抗体阴性不能排除感染丙肝[N];健康报;2003年

3 本报记者 李天舒　胡德荣;捕捉一等奖“闪光点”[N];健康报;2010年

4 胡德荣;上海:非典病毒特异性抗体制备成功[N];健康报;2003年

5 通讯员 吴志军;我国丙型肝炎疫苗研究进展获突破[N];科技日报;2003年

6 记者 刘欢;同性恋人群艾滋病感染率达7.26%[N];北京日报;2010年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 刘海灿;结核分枝杆菌八种蛋白抗原中人T/B细胞抗原表位多态性研究[D];中国疾病预防控制中心;2014年

2 郭爱疆;猪带绦虫六钩蚴TSOL18抗原表位及组织定位的研究[D];甘肃农业大学;2010年

3 商绍彬;猪圆环病毒衣壳蛋白抗原表位的精细定位与间接ELISA检测技术[D];浙江大学;2007年

4 王艳华;弓形虫代谢分泌抗原和表面蛋白1抗原表位研究[D];中国农业科学院;2011年

5 刘霄卉;JSRV表面蛋白抗原表位的筛选及检测试剂盒的制备[D];内蒙古农业大学;2011年

6 李峥;高致病性禽流感H5N1病毒血凝素蛋白中和抗原表位鉴定及其跨物种传播规律的研究[D];北京协和医学院;2009年

7 蔡瑞琨;高免疫原性T细胞抗原表位预测方法的研究[D];华中科技大学;2012年

8 张巍;抗人TNF-α单抗Z12识别的抗原表位研究及其人源化改造[D];中国人民解放军军事医学科学院;2003年

9 耿宏伟;蓝舌病病毒群特异性构象抗原表位的初步鉴定及竞争ELISA检测方法的建立与应用[D];东北农业大学;2012年

10 王哲;耶尔森氏菌蛋白在促甲状腺素受体自身抗体产生中分子模拟机制的研究[D];山东大学;2010年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 张志榜;猪流行性腹泻病毒膜蛋白和核蛋白抗原表位的鉴定[D];中国农业科学院;2011年

2 石晓妮;小反刍兽疫病毒H、F蛋白抗原表位的鉴定和免疫学特性研究[D];甘肃农业大学;2011年

3 邱炎;幽门螺杆菌尿素酶B抗原表位的鉴定[D];华中农业大学;2010年

4 张琳;鸭坦布苏病毒E蛋白抗原表位的鉴定[D];山东农业大学;2013年

5 魏刚刚;血吸虫蛋白抗原表位的预测及其在诊断抗原筛选方面的应用[D];华东理工大学;2013年

6 张婷;抗人CD40单抗5C11抗原识别表位的初步研究[D];苏州大学;2011年

7 刘畅;抗肾小球基底膜病患者血清抗体的异质性及其临床病理的相关性分析[D];郑州大学;2010年

8 陈欣;副猪嗜血杆菌的分离与单抗制备及其抗原表位鉴定[D];中国农业科学院;2011年

9 郝辉;SBEM蛋白在不同乳腺癌细胞中的表达及抗原表位的预测[D];大连医科大学;2012年

10 黄垭婷;日本乙型脑炎病毒E蛋白单克隆抗体的筛选及其抗原表位的初步鉴定研究[D];四川农业大学;2011年

，

本文编号：543661