miRNA-181b在氧-糖剥夺致N2A细胞缺血损伤中的作用及对热休克蛋白A5表达的调节

发布时间：2017-07-20 12:24

  本文关键词：miRNA-181b在氧-糖剥夺致N2A细胞缺血损伤中的作用及对热休克蛋白A5表达的调节

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【摘要】：目的探讨miR-181b在氧糖剥夺(OGD)致N2As神经瘤细胞缺血损伤中的作用,及其对热休克蛋白(HSP)A5表达的调节。方法应用N2A细胞OGD模型模拟神经细胞缺血损伤,MTT比色法检测N2A细胞生存率,免疫印迹法检测HSPA5蛋白表达水平,实时定量PCR法检测miR-181b和HSPA5 mRNA表达水平,荧光素酶报告基因技术检测miR-181b对HSPA5 mRNA的直接调控作用。结果 miR-181b在OGD致N2A细胞缺血损伤中表达水平明显降低(n=5);在OGD致N2A细胞缺血损伤过程中,通过上调或抑制miR-181b的表达水平可以显著影响N2A细胞的生存率(n=6);而在非OGD条件下,miR-181b表达水平的改变对N2A细胞活力无影响;miR-181b表达水平的改变可显著影响HSPA5蛋白表达水平(n=3),而非HSPA5的mRNA水平;共转染miR-181b前体(premiR-181b)或miR-181b抑制剂(anti-miR-181b)可显著抑制或增高含有HSPA5 mRNA 3’-UTR的荧光素酶报告基因的活性(n=5)。结论 miR-181b通过负性调节HSPA5的蛋白表达水平,在OGD致N2A神经细胞缺血性损伤中发挥重要作用。
【作者单位】： 首都医科大学神经生物学系北京脑重大疾病研究院;
【关键词】： 氧-糖剥夺 缺血性损伤 miR-b 热休克蛋白A 免疫印迹法 实时定量PCR 双荧光素酶报告基因分析 NA细胞
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31071048,31171147) 国家重点基础性研究资助项目(2012CB18200) 973前期专项资金资助项目(2011CB512109)
【分类号】：R363
【正文快照】： 目前,缺血性脑卒中已成为全球人口死亡及致残的重要疾病[1]。脑缺血后,由于组织血供不足,神经细胞代谢障碍,最终导致细胞不可逆性损伤和死亡的一系列病理生理学过程和机制已比较清楚,但目前临床上对脑卒中的治疗尚缺乏有效措施[2]。因此,阐明脑缺血/低氧预适应(ischemia/hypox

【共引文献】

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本文编号：568025