不同细胞外基质对晚期内皮祖细胞功能特征的影响

发布时间：2017-07-27 05:13

  本文关键词：不同细胞外基质对晚期内皮祖细胞功能特征的影响

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【摘要】：本文旨在探讨不同细胞外基质(extracellular matrix,ECM)对大鼠骨髓来源的晚期内皮祖细胞(endothelial progenitorcells,EPCs)生物学特性的影响。密度梯度离心法分离大鼠骨髓单核细胞,应用M199完全培养基进行体外培养,培养基中添加15%胎牛血清、10μg/L血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及5μg/L碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblast growth factor,bFGF)。在接种细胞前,培养板分别用纤维粘连蛋白(fibronectin,Fn)、层粘连蛋白(laminin,Ln)或鼠尾胶原(collagen,Col)包被,定义为Fn组、Ln组及Col组。传至第三代EPCs(晚期EPCs)时,采用CCK-8法、EdU标记法、粘附能力测定实验、划痕实验及Matrigel法分别检测细胞增殖、粘附、迁移及血管形成情况;应用荧光定量RT-PCR检测内皮分化标志基因vWF和CD31的表达;应用流式细胞术检测细胞凋亡。结果显示,Fn组和Col组细胞增殖能力强于Ln组;Fn组细胞粘附能力强于Col组和Ln组;Fn组和Col组细胞迁移能力强于Ln组(P0.05);Fn组血管形成能力强于Col组及Ln组(P0.05);Ln组血清饥饿所诱导的细胞凋亡率大于Fn组和Col组(P0.01),但三组vWF和CD31基因表达及自发凋亡之间均无明显差异。以上结果表明,EPCs的生物学特性受ECM的影响,这将为人工心、血管的ECM血管支架材料选择方面提供一定的参考依据。
【作者单位】： 潍坊医学院医学基础医学院生理教研室;
【关键词】： 细胞外基质 内皮祖细胞 纤维粘连蛋白 层粘连蛋白 鼠尾胶原
【基金】：supported by the National Natural Science Foundation of China(No.30900290,31270993) Program for New Century Excellent Talents in Universities of Ministry of Education,China(No.NCET-10-0922) the Natural Science Foundation of Shandong Province,China(No.ZR2009CQ027,ZR2011CQ030) the Medicine and Health Science and Technology Project of Shandong Province,China(No.2011QZ024)
【分类号】：R329
【正文快照】： 内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是一类能分化为成熟血管内皮细胞的前体,又称血管母细胞(angioblast)或血管内皮干细胞(endothelialstem cells)[1]。研究表明,EPCs不仅参与胚胎期血管生成,同时也参与出生后血管新生和内皮损伤后的修复过程[2]。动物实验及临床

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本文编号：579931