抗TRPC6多肽单克隆抗体的制备及其识别抗原表位分析

发布时间：2017-07-31 15:36

  本文关键词：抗TRPC6多肽单克隆抗体的制备及其识别抗原表位分析

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【摘要】：目的:制备抗TRPC6多肽单克降抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法:采用TRPC6多肽偶联血蓝蛋白(KLH)为抗原,免疫小鼠后经细胞融合,间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞;单克隆抗体亚类检测试剂盒鉴定Ig亚型;间接ELISA法鉴定该单克隆抗体的特性、效价及其相对亲和力;采用生物信息学进行抗原表位预测,并通过ELISA单抗相加试验分析单抗识别抗原位点的差异性。结果:获得3株能稳定分泌抗TRPC6多肽的单抗杂交瘤细胞株,分别命名为A2、F11和H8;抗体Ig亚类均为IgG1型;染色体鉴定符合杂交瘤细胞的特性;3株单抗相对亲和力比较F11较强,A2和H8接近;抗体识别位点分析结果表明A2与H8、A2与F11的相加指数分别大于50%,可能识别的是不同位点;而F11与H8的相加指数小于50%,可能识别的是同一位点。结论:抗TRPC6多肽单克隆抗体的成功制备及其识别抗原表位分析,为TRPC6蛋白的相关研究提供物质基础。
【作者单位】： 广东药学院微生物学与免疫学教研室;广州医科大学第一附属医院呼吸疾病国家重点实验室;中山宝元生物工程有限公司;中山市博爱医院肾内科;
【关键词】： TRPC 单克隆抗体 抗原表位
【基金】：华南中医药城项目(20101H014) 中山市科技计划项目(20102A021)资助
【分类号】：R392-33
【正文快照】： 瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(Transient re-ceptor potential channel,TRPC6)是瞬时受体电位阳离子通道(TRPC)一个亚群,Winn等2005年首次报道TRPC6通道位于肾小球足细胞,是裂隙膜的重要组成部分,编码足细胞结构蛋白,其表达量的改变可导致大量蛋白尿,从而引起局灶节段性肾小球

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本文编号：599889