mirRNA质粒和RAN干扰技术下调人脐血干细胞基因的研究

发布时间：2017-08-01 03:15

  本文关键词：mirRNA质粒和RAN干扰技术下调人脐血干细胞基因的研究

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【摘要】：目的探讨microRNA(miR)30为基础的shRNA干扰技术能否有效下调人脐血干细胞的基因。方法应用不同的第2代慢病毒包装质粒在293T细胞中包装病毒,检测病毒滴度和人脐血CD34+细胞转染效率。结果第2代慢病毒包装质粒可在人293T细胞中产生高滴度病毒(2×106TU/mL以上)。与包装质粒pCMV-dR8.91(6.8%~17.4%,平均14.2%)相比,pCMV-dR8.74(psPAX2)(12.3%~31.8%,平均26.5%,P0.05)产生的病毒转染脐血干细胞的效率更高。结论应用shRNAmir和RNA干扰技术可有效下调人脐血CD34+细胞的基因。
【作者单位】： 第二军医大学长海医院输血科;中国医学科学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室;
【关键词】： RNA干扰 嵌入microRNA的短链发夹RNA 脐血
【分类号】：R341
【正文快照】： RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)是目前在多种细胞模型中广泛应用的通过下调基因表达、进行相关基因功能缺失后研究的有效手段[1~3]。病毒载体基础上的短链发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)是目前应用最多的RNA干扰方法,但是往往受到组织特异性低,选择性下调效果差和长

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本文编号：602286