Oct-4在小鼠骨髓间充质干细胞定向诱导分化中的甲基化状态

发布时间：2017-08-05 09:22

  本文关键词：Oct-4在小鼠骨髓间充质干细胞定向诱导分化中的甲基化状态

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【摘要】：目的研究Oct-4在小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)定向诱导分化中的甲基化状态。方法全骨髓贴壁筛选法培养小鼠BMSCs,通过形态学观察及免疫细胞化学进行鉴定。骨块接种培养法培养小鼠成骨细胞,采用碱性磷酸酶(AKP)及茜素红进行鉴定。诱导小鼠BMSCs向成骨细胞分化,采用间接免疫荧光染色和RT-PCR法观察Oct-4在小鼠BMSCs诱导分化前后的表达情况,甲基化特异性PCR检测Oct-4在小鼠BMSCs诱导分化前后的甲基化状态。结果分离培养的小鼠BMSCs在体外能大量增殖,形成形态均一的细胞集落,培养细胞的CD29、c-Kit和CD44呈阳性表达,CD34呈阴性表达。诱导10d后的细胞及从小鼠颅骨中分离、培养出的成骨细胞,AKP及茜素红染色呈阳性。间接免疫荧光染色和RT-PCR结果显示,Oct-4在小鼠BMSCs定向诱导分化中表达下调。小鼠BMSCs定向诱导分化中Oct-4基因启动子区的CpG岛出现了甲基化。结论成功在体外培养了小鼠BMSCs及小鼠成骨细胞,Oct-4基因可能参与了成体干细胞多潜能性的维持,Oct-4基因在小鼠BMSCs定向诱导分化中的表达下调可能是其启动子区CpG岛甲基化的缘故。
【作者单位】： 石河子大学医学院组织胚胎学教研室;海南省生殖医学中心;石河子大学医学院第一附属医院骨科;
【关键词】： Oct- 小鼠骨髓间充质干细胞 分化 甲基化
【分类号】：R329
【正文快照】： 骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)是目前研究最为广泛的一种成体干细胞。随着BMSCs的分离培养、细胞系建立以及体外定向诱导分化技术的日趋成熟,为临床应用带来了极大的便利,但是有关干细胞定向诱导分化调控机制的研究尚未取得突破性进展。Oct-4基因既能

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