乙酰肝素酶可变剪接体Splice 5在CHO细胞中的稳定转染及其亚细胞定位研究
本文关键词:乙酰肝素酶可变剪接体Splice 5在CHO细胞中的稳定转染及其亚细胞定位研究
【摘要】:目的建立乙酰肝素酶可变剪接体Splice 5稳定转染中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株,并进行亚细胞定位分析。方法将表达乙酰肝素酶全长的质粒和乙酰肝素酶可变剪接体Splice 5质粒转染入CHO细胞,经G418进行筛选后,挑取单克隆进行培养,RT-PCR检测筛选克隆。用激光共聚焦显微镜测定其亚细胞定位。结果成功获得乙酰肝素酶可变剪接体Splice 5稳定转染株,并研究了其亚细胞定位情况。野生型乙酰肝素酶以颗粒状分布于细胞质中,Splice 5以弥散状分布于细胞质中,且在内质网、高尔基体、溶酶体、细胞膜均有分布。结论 Splice 5和野生型乙酰肝素酶在CHO细胞中分布形式和定位的不同,提示Splice 5可能具有其他的生物学功能。
【作者单位】: 广西医科大学;军事医学科学院野战输血研究所;
【关键词】: 乙酰肝素酶 可变剪接体 转染 亚细胞定位
【分类号】:R341
【正文快照】: 乙酰肝素酶(heparanase,HPA)是肿瘤细胞扩散与转移过程中的一种重要的功能酶,是体内唯一能分解细胞外基质和基底膜中硫酸肝素侧链的β-葡萄糖苷内切酶,可特异性地识别硫酸肝素侧链上的特异性位点,降解特异性位点上的硫酸肝素蛋白聚糖,促进肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移、黏附和
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,本文编号:636936
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