5-Fu联合顺铂对种植VX-2细胞家兔模型化疗研究

发布时间：2017-08-07 21:03

  本文关键词：5-Fu联合顺铂对种植VX-2细胞家兔模型化疗研究

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【摘要】：目的:1.通过构建家兔外置大肠癌模型,观察肿瘤浸泡化疗对肿瘤的作用,用以作为临床治疗中肠腔灌注化疗的参考,评价是否可通过术前常规洗肠与肠腔化疗相结合的方式,达到更好的治疗大肠癌的效果。2.通过MTT法检测VX-2细胞存活率,观察体外聚乙二醇联合5-fu、顺铂的抗肿瘤作用。方法:第一部分:制备家兔外置大肠癌模型:选取健康家兔,雄性,体重1.8-2.5kg,对其行大肠外置手术,对术后家兔外置的大肠采用肿瘤细胞悬液注射法制备造外置大肠癌模型,造模术后每天观察肿瘤生长情况,同时对造外置大肠肿瘤行体积大小测定,选出肿瘤大小相似的模型20只家兔随机分为4组。将4组家兔分为3个治疗组及1个聚乙二醇对照组:聚乙二醇对照组(A组,n=5),聚乙二醇+5-Fu浸泡化疗组(0.75g/L),(B组,n=5),聚乙二醇+顺铂(400mg/L)浸泡化疗组(C组,n=5),聚乙二醇+5-Fu(0.75g/L)+顺铂(400mg/L)浸泡化疗组(D组,n=5)。治疗组行2次浸泡化疗,间隔时间为3天。浸泡前一天及结束后第三天均行血常规、电解质、肝肾功能检查,对比浸泡化疗前后变化情况,取肿瘤组织送病检,经免疫组化方法检测各组血管内皮生长因子、增殖细胞核抗原表达水平并比较。第二部分:聚乙二醇联合不同浓度的5-fu及顺铂,VX-2细胞悬液200μl接种于96孔板内,设一个空白对照组(1640培养液)和8个药物实验组,每组设4个副空,细胞培养24小时后将不同浓度的药物20μl加入实验组,置于37.0℃培养箱中,分别于细胞培养24h后加入MMT 20μl,观察不同浓度的药物溶物作用细胞培养24小时后细胞的生存率状况。结果:1.术后三周内,约70%家兔种植肿瘤后外置大肠部分出现肿瘤灶,表明肿瘤细胞悬液注射法能成功造模且较为稳定;2.各治疗组在肿瘤浸泡化疗前后的血红蛋白、白细胞、红细胞等血常规指标,总蛋白、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、血肌酐等肝肾功能及钠、钾、钙离子等电解质指标不具统计学意义(P0.5),各组实验动物在行造模手术后10天内呈现精神不振,食欲、体重下降;3.实验组中动物生存期相对于对照组延长,实验组中D组生存期最长,D、B、C组对照A组(P0.05),D组分别对照B组、C组(P0.05);4.B、C、D组血管内皮生长因子(VEGF)灰度值均高于A组,B、C、D组与A组两两对比(P0.05),D组与B、C组对比(P0.05);5.B、C、D增殖细胞核抗原(PCNA)灰度值均高于A组,B、C、D组与A组两两对比(P0.05),D组与B、C组对比(P0.05);6.聚乙二醇与不同浓度的5-fu及顺铂搭配作用细胞24h后对VX-2细胞均具有一定的抑制作用。结论:1.VX-2细胞悬液注射法制备家兔外置大肠癌模型成功率较高,模型稳定能满足实验需求。2.5-Fu、顺铂及5-Fu联合顺铂溶解于聚乙二醇溶液中对肿瘤浸泡化疗方案均安全有效,对肿瘤细胞有直接杀伤作用,延长实验动物生存时间,且顺铂联合5-Fu对肿瘤浸泡化疗的疗效优于单药组。3.体外实验中,5-fu及顺铂对VX-2细胞的杀伤作用与浓度呈正比,并且当两者联合使用时有一定协同作用。
【关键词】：VX-2细胞 肿瘤浸泡化疗 外置大肠癌
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.34;R-332
【目录】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-12
• 主要英文缩略语索引12-14
• 前言14-18
• 第一部分 5-Fu联合顺铂对种植VX-2 细胞家兔模型化疗研究18-36
• 1 实验材料18-19
• 2 实验流程与方法19-26
• 3 统计分析26
• 4 实验结果26-36
• 第二部分 聚乙二醇联合 5 - f u、顺铂的抗肿瘤作用研究36-44
• 1 实验材料36
• 2 实验设计36-37
• 3 实验方法37-38
• 4 实验结果38-40
• 讨论40-44
• 第三部分 结论44-46
• 参考文献46-50
• 综述50-54
• 参考文献53-54
• 硕士研究生期间发表的论文54-56
• 致谢56-57

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