人TRAF3IP3基因的克隆及真核表达

发布时间：2017-08-07 20:22

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【摘要】：目的构建人肿瘤坏死因子受体相关因子3相互作用蛋白3(TRAF3IP3)基因真核表达载体,并进行表达检测及鉴定。方法 RT-PCR扩增获得TRAF3IP3开放读码框区基因,双酶切连入真核表达载体pIRES2-EGFP,双酶切和测序鉴定阳性克隆;重组质粒磷酸钙法转染HEK293细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,实时定量PCR和Western blot法鉴定TRAF3IP3基因的表达情况。结果经限制性内切酶酶切鉴定和测序证实,成功构建了TRAF3IP3真核表达质粒,荧光显微镜观察可见转染了重组质粒的HEK293细胞有绿色荧光蛋白的表达,实时定量PCR和Western blot结果证实TRAF3IP3蛋白高水平表达。结论成功构建了pIRES-EGFP-TRAF3IP3真核表达质粒,为TRAF3IP3基因功能的研究奠定了基础。
【作者单位】： 河北联合大学附属医院检验科;河北联合大学生命科学学院;
【关键词】： TRAFIP 真核表达 转染 HEK细胞
【基金】：国家自然科学基金(81072093) 河北省青年科学基金(C2012401039)
【分类号】：R346
【正文快照】： TRAF3IP3(TRAF3 interacting protein 3)又被称作T3JAM[TRAF3-interacting Jun N-terminal kinase(JNK)-activating modulator],是2003年发现的一个人类基因,因其蛋白产物能够特异性地与肿瘤坏子因子受体相关因子3(TNF receptor-associated factor 3,TRAF3)蛋白相互作用而得

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本文编号：636538