应用抑制性消减杂交筛选志贺菌基因转移耐多药相关基因
本文关键词:应用抑制性消减杂交筛选志贺菌基因转移耐多药相关基因
【摘要】:目的:应用抑制性消减杂交技术初步筛选志贺菌基因转移耐多药相关基因。方法:以志贺菌基因转移耐多药株DNA为检测子,以其敏感株DNA为驱赶子,构建DNA消减文库,采用PCR鉴定及斑点杂交进行筛选,并随机挑取阳性克隆测序,所得结果在GenBank中进行同源性比较和分析。结果:成功构建了志贺菌基因转移耐多药株的特异性DNA消减杂交文库。选取部分阳性克隆进行杂交筛选,其中5个测序成功,与GenBank数据库进行初步比对,3个可能为新基因,2个为已知基因(Tn3926转座子部分的转座酶基因及23SrRNA核糖体核糖核酸)。结论:成功构建了志贺菌基因转移耐多药株的特异性DNA消减杂交文库并获得了其耐多药相关基因,提示转座子介导的耐药机制可能在志贺菌基因转移耐多药中起重要作用。
【作者单位】: 郑州大学公共卫生学院流行病学教研室;河南科技大学医学院预防医学教研室;
【关键词】: 志贺菌 基因转移 耐多药相关基因
【基金】:河南省医学科技攻关基金资助项目WKJ2007-2-024
【分类号】:R378
【正文快照】: 近年来,随着抗生素的广泛应用甚至滥用,志贺菌菌株频繁发生变异,产生耐药株,且耐药率高、耐药产生速度快及范围广[1-2],给细菌性痢疾的防治带来新的挑战,因此深入探讨志贺菌耐多药机制成为目前解决志贺菌耐多药的先决条件。该实验采用差异表达基因克隆技术抑制性消减杂交[3],
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