小鼠巨噬细胞内表达结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白对细胞增殖和凋亡的影响

发布时间：2017-08-08 22:23

  本文关键词：小鼠巨噬细胞内表达结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白对细胞增殖和凋亡的影响

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【摘要】：目的:建立培养滤液蛋白10-早期分泌性抗原靶6(CFP10-ESAT6)真核表达质粒并转染RAW264.7巨噬细胞,观察胞内表达CFP10-ESAT6对细胞活性及凋亡的影响,并初步探讨其机制。方法:将CFP10-ESAT6融合基因插入真核表达质粒pEGFP-N1,构建重组质粒,转染RAW264.7巨噬细胞。采用MTT的方法测定CFP10-ESAT6融合蛋白对RAW264.7巨噬细胞活性的影响,采用结核分枝杆菌19 kD脂蛋白和十字孢碱(staurosporine)处理RAW264.7巨噬细胞,并以流式细胞术检测细胞凋亡率以及Toll样受体2(TLR2)的表达。结果:成功构建了重组质粒pEGFP-N1/CFP10-ESAT6并转染至RAW264.7巨噬细胞;与对照组相比,胞内表达CFP10-ESAT6不能影响巨噬细胞的活性,但可以明显抑制结核分枝杆菌19 kD脂蛋白所造成的凋亡(P0.05),并显著抑制了TLR2的表达(P0.05)。结论:巨噬细胞内表达的CFP10-ESAT6融合蛋白不具有细胞毒性作用,但可以通过下调TLR2的表达来抑制结核分枝杆菌19 kD脂蛋白所造成的凋亡。
【作者单位】： 河南省人民医院感染控制科 细菌室;
【关键词】： 结核分枝杆菌 培养滤液蛋白 早期分泌性抗原靶 巨噬细胞 细胞增殖 细胞凋亡
【基金】：河南省医学科技攻关计划普通项目(No.201203094)
【分类号】：R363
【正文快照】： 结核分枝杆菌是一种典型的胞内致病菌,可以通过多种不同的机制逃逸机体免疫细胞的杀伤及清除,从而在宿主细胞内进行复制和繁殖,并长期存活于机体内。有证据显示宿主可以通过诱导受感染巨噬细胞的凋亡来抑制胞内结核分枝杆菌的生长[1-2]。进一步的研究表明分枝杆菌毒力株抑制

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