免疫调节因子TIPE2慢病毒载体的构建及病毒包装

发布时间：2017-08-09 04:01

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【摘要】：目的:TIPE2[Tumor necrosis factor(TNF)-αinduced protein 8-like 2(TNFAIP8L2),TIPE2]慢病毒载体的构建及病毒包装。方法:首先构建带有3×FLAG标签的pCDNA3.1-3×FLAG-TIPE2质粒,确认表达后再将标签连同TIPE2序列一起克隆入pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro慢病毒表达载体,然后与pMD2.G、psPAX2共转染293T细胞并收获上清,进一步用含病毒颗粒的上清感染PLC/PRF/5及HEK293T细胞,Western blot检测感染后TIPE2蛋白表达情况。结果:pCDNA3.1-3×FLAGTIPE2及pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro-TIPE2质粒构建成功,并能最终产出具有感染性的病毒颗粒。结论:成功构建了TIPE2慢病毒载体并获得具有感染性的病毒颗粒,为进一步研究TIPE2功能提供了有力的支持。
【作者单位】： 河南大学医学院抗体药物河南省工程实验室;
【关键词】： 免疫调节因子 TIPE 慢病毒 病毒包装
【基金】：国家自然科学基金资助(30972687)
【分类号】：R392-3
【正文快照】： TIPE2[Tumor necrosis factor(TNF)-αinducedprotein 8-like 2(TNFAIP8L2)]是近年被鉴定出来的新型免疫调节因子,隶属于TNFAIP8家族,具有维持机体免疫自稳的功能[1]。在老鼠体内,TIPE2主要表达于淋巴系统或炎症组织,可通过抑制TCR(T细胞受体)及TLR(Toll-like receptor)通路来

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本文编号：643372