鸟结核分枝杆菌感染巨噬细胞后的外泌体刺激巨噬细胞产生的细胞因子及其蛋白质表达改变

发布时间：2017-08-15 16:05

  本文关键词：鸟结核分枝杆菌感染巨噬细胞后的外泌体刺激巨噬细胞产生的细胞因子及其蛋白质表达改变

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【摘要】：目的探讨鸟结核分枝杆菌(M.avium)感染巨噬细胞后分泌的外泌体[(+)外泌体]刺激巨噬细胞后产生的分子免疫机制及其差异蛋白质成分研究。方法冷冻高速离心法收集经鸟分枝结核杆菌感染及未感染的巨噬细胞上清中的外泌体,然后利用外泌体刺激巨噬细胞;ELISA方法检测经外泌体刺激巨噬细胞后细胞上清中IFN-γ、TNF-α的含量;流式细胞术从蛋白水平检测巨噬细胞受外泌体刺激后CD80、CD86蛋白表达情况;2-DE MALDI-TOF/TOF MS技术分析鉴定巨噬细胞受M.avium感染后分泌的外泌体中的差异蛋白。结果 IFN-γ、TNF-α在(+)外泌体刺激巨噬细胞后培养上清中含量增加;CD80、CD86蛋白在巨噬细胞受(+)外泌体刺激后表达上调。外泌体经2-DE MALDI TOF/TOF MS分析获得18个差异蛋白,且质谱成功鉴定12个。结论 (+)外泌体促进巨噬细胞TNF-α、IFN-γ的分泌从而增强巨噬细胞的炎症反应,并且可促进巨噬细胞CD80、CD86蛋白表达增强;筛选出差异蛋白的功能与细胞骨架结构、蛋白质合成与加工,炎症反应密切相关。
【作者单位】： 中南大学生物科学与技术学院分子生物学研究中心;江苏省昆山市第一人民医院;湖南省结核病防治所;中南大学生物科学与技术学院生物实验室;
【关键词】： 巨噬细胞 外泌体 M.avium -DE MALDI-TOF/TOFMS
【基金】：国家自然科学基金(81071326) 湖南省杰出青年基金(04JJ1006)
【分类号】：R392.11
【正文快照】： 外泌体(exosome)是由晚期内体(endosome)形成并分泌到胞外的一种膜性小囊泡[1]。抗原提呈细胞(antigen-presenting cell,APC),如B淋巴细胞和树突状细胞都能分泌外泌体,在机体免疫中发挥有效的免疫刺激作用,刺激T淋巴细胞增殖引起免疫应答[2]。外泌体含有丰富蛋白成分如MHC-Ⅰ

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本文编号：679041