金黄色葡萄球菌VBNC状态的诱导条件和EMA-qPCR检测

发布时间：2017-08-15 17:41

  本文关键词：金黄色葡萄球菌VBNC状态的诱导条件和EMA-qPCR检测

  更多相关文章： 金黄色葡萄球菌 活的非可培养状态 诱导条件 叠氮溴乙锭 qPCR

【摘要】：为建立金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)活的非可培养(VBNC)状态的诱导条件模型,考察了温度、盐度和酸度3个因素对金黄色葡萄球菌细菌可培养数的影响,通过正交试验优化得到了VBNC状态的诱导条件,同时观察细菌可培养数的变化,建立了DNA结合染料叠氮溴乙锭(EMA)与qPCR技术相结合检测VBNC金黄色葡萄球菌的方法.实验结果表明:细菌可培养数受酸度的影响最大,VBNC状态的最佳诱导条件为菌液在含15%NaCl和0.3%乙酸的营养肉汤培养基中于4℃下培养12 d;通过正交试验诱导后的不可培养菌可由EMA-qPCR方法有效检出,其与qPCR法的Ct值(荧光信号达到设定的阈值所经历的循环数)之差在1.29～8.56之间变化.
【作者单位】： 华南理工大学轻工与食品学院;
【关键词】： 金黄色葡萄球菌 活的非可培养状态 诱导条件 叠氮溴乙锭 qPCR
【基金】：国家自然科学基金青年科学基金资助项目(31101279) 教育部高等学校博士学科点专项科研基金新教师类资助课题(20110172120034) 华南理工大学中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(2011ZM0101) 广东省天然产物绿色加工与产品安全重点实验室开放课题(201101)
【分类号】：R378
【正文快照】： 金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus,简称SA)是一种常见的高致病性革兰氏阳性菌,传播途径较多,对人类的安全构成了威胁.食品中的SA在一定情况下可以产生肠毒素,从而导致食物中毒.由SA引起的食品安全问题广泛存在[1],因此,对SA进行检测十分重要,而检测的关键是食品中活菌是

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 鲁梅芳;金玉妍;;金黄色葡萄球菌活的非可培养状态的诱导和检出[J];环境与健康杂志;2009年10期

2 鲁玉侠;郭祀远;石磊;李琳;;EMA-LAMP方法快速检测死/活的食源性沙门氏菌[J];食品科学;2009年22期

3 李影;段锐;钱爱东;王伟利;;“活的非可培养状态”细菌荧光观察方法[J];生物技术;2010年03期

4 张严峻,张俊彦,梅玲玲,王志刚,朱敏,王赞信;金黄色葡萄球菌肠毒素基因的分型和分布[J];中国卫生检验杂志;2005年06期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 叶云;钟英英;;PCR法检测水中金黄色葡萄球菌肠毒素A基因[J];安徽农业科学;2008年26期

2 王营;于宏伟;郭润芳;贾英民;;金黄色葡萄球菌肠毒素基因分布的研究[J];河北农业大学学报;2010年05期

3 姜毓君;李一松;相丽;毕宇涵;赵凤;;RT-PCR检测金黄色葡萄球菌肠毒素A基因[J];东北农业大学学报;2009年02期

4 闫军;遇晓杰;苏华;张剑峰;谢平会;薛成玉;董锐;高飞;;原料乳中金黄色葡萄球菌风险评估基础研究[J];中国公共卫生管理;2010年01期

5 高世光;郝陶光;;丹东口岸出口食品中金黄色葡萄球菌及肠毒素检测分析[J];中国国境卫生检疫杂志;2010年03期

6 苏明权;杨柳;马越云;常亮;肖凤静;郝晓柯;;实时荧光定量PCR检测金黄色葡萄球菌方法的试验研究[J];国际检验医学杂志;2010年08期

7 王丽;王冰;黎桂莲;林一曼;贺连华;石晓路;吴平芳;陈妙玲;;金黄色葡萄球菌肠毒素快速分型体系的建立及应用[J];国际检验医学杂志;2012年02期

8 陆贞玉;;食品中金黄色葡萄球菌及其检测方法现况[J];应用预防医学;2010年S1期

9 史红;王娟;郑增忍;单虎;王述柏;李玉清;黄秀梅;刘开成;韩艳;张鹏;;金黄色葡萄球菌耐药性及肠毒素分型研究[J];动物医学进展;2012年06期

10 许振伟;韩奕奕;孟瑾;郑小平;邹明辉;;熟食肉制品中金黄色葡萄球菌风险评估基础研究[J];包装与食品机械;2012年05期

中国重要会议论文全文数据库 前3条

1 张颖;莫自耀;庞杏林;邓志爱;张欣强;陈守义;王鸣;;一起食物中毒事件的金黄色葡萄球菌分子分型研究[A];2010广东省预防医学会学术年会资料汇编[C];2010年

2 何永盛;;食品中有害微生物快速检测技术的研究进展[A];2010第二届中国食品安全高峰论坛论文集[C];2010年

3 唐吉思;吴金花;布日额;张海宝;薛晓阳;刘洋;;内蒙古牛乳中产肠毒素A型金黄色葡萄球菌的分离与鉴定[A];第3届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2011年

中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 祝儒刚;海产品中致病性副溶血弧菌PCR快速检测体系建立及定量研究[D];沈阳农业大学;2011年

2 马保臣;奶牛乳腺炎病因学和金黄色葡萄球菌的分子调查及Fnbp蛋白免疫[D];山东农业大学;2006年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 罗晶晶;斑点叉尾洶生鱼片加工过程中的微生物变化[D];华中农业大学;2010年

2 丁岚;产金黄色葡萄球菌肠毒素A工程菌构建及其发酵条件研究[D];华中农业大学;2010年

3 吕亚楠;VBNC单核增生性李斯特杆菌mRNA抑制性消减杂交差异基因的克隆与分析[D];吉林农业大学;2011年

4 苏培成;功能化纳米粒子的制备及其在毒素快速检测中的应用研究[D];湖南师范大学;2011年

5 赵明君;海洋弧菌复苏促进因子家族糖蛋白酶的研究[D];中国海洋大学;2011年

6 王静思;新型葡萄球菌肠毒素SEG、SEU的表达及结构功能分析[D];天津大学;2010年

7 凌巍;金黄色葡萄球菌的分布及其肠毒素基因的研究[D];河北农业大学;2007年

8 索玉娟;食品中金黄色葡萄球菌的分布及其肠毒素基因的研究[D];河北农业大学;2008年

9 段鸿斌;乳中金黄色葡萄球菌B型肠毒素的酶联免疫检测[D];西北农林科技大学;2008年

10 闫军;原料乳中金黄色葡萄球菌的风险评估[D];东北农业大学;2008年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 高涛;食品中金黄色葡萄球菌肠毒素及检测方法的研究进展[J];福建分析测试;2003年02期

2 魏忠彬;李影;钱爱东;段锐;;VBNC状态乳酸杆菌的复苏[J];中国饲料;2006年18期

3 吴慧清 ,吴清平 ,张菊梅 ,马永;生物发光检测法和国标法检测样品中活菌总数的比较研究[J];食品工业科技;2004年04期

4 曾冰冰;肖凯军;石磊;肖如武;;LAMP方法在食品微生物检测中的应用[J];现代食品与药品杂志;2007年01期

5 李沂轩,纪岩文;吖啶橙染色方法检查线索细胞[J];中国皮肤性病学杂志;2005年11期

6 李影;王伟利;钱爱东;;畜产品相关食源性致病菌“活的非可培养状态”的检测策略[J];中国动物检疫;2009年01期

7 李影;魏忠彬;钱爱东;段锐;;乳酸杆菌活的非可培养状态诱导条件的筛选与荧光观察[J];中国兽医科学;2008年10期

8 孙晓媛;李影;;细菌的“VBNC”状态在开发未可培养微生物中的探索[J];中国预防兽医学报;2008年12期

9 孙晓媛;钱爱东;李影;;三株沙门氏菌VBNC状态诱导条件的筛选[J];中国预防兽医学报;2009年03期

10 陈欣;张雅莲;孙永华;甄然;于东宁;;我院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性及肠毒素分析[J];中华整形烧伤外科杂志;1997年05期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 冯理达,包桂文,钱菊卿,李素英;气功“外气”对革兰氏阳性球菌作用情况观察[J];自然杂志;1982年09期

2 王秀梅;人体多形核白细胞对金黄色葡萄球菌粘附和吞入的动力学同时检测[J];国际检验医学杂志;1985年06期

3 陈小英;冯瑞山;陈知本;;金黄色葡萄球菌抗生素耐药质粒DNA的抽提及检测[J];中国药科大学学报;1985年02期

4 王松森;;教学中常用的一种实验细菌——葡萄球菌[J];生物学通报;1993年01期

5 张杏怡,何礼贤,胡必杰,李锡莹;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性研究[J];中华医院感染学杂志;1996年02期

6 裴建武;甘孟侯;;鸡源金黄色葡萄球菌耐药性转移的研究[J];中国兽医杂志;1996年04期

7 李菁华,王东辉,关显智,周密;金黄色葡萄球菌耐药性(R)质粒的鉴定[J];白求恩医科大学学报;1997年03期

8 林燕英,梁军,杨明学,黄永茂;金黄色葡萄球菌β-内酰胺酶测定及药敏分析[J];泸州医学院学报;1997年01期

9 温建新;奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌血清型的分离鉴定[J];中国奶牛;2000年02期

10 周娅,赵忠,赵舒斌,王宁萍;金黄色葡萄球菌耐药表型检测[J];宁夏医学杂志;2000年02期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 丁晓飞;郝莉;李冰燕;张增利;;1,25(OH)_2D_3对巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌过程的影响[A];中国营养学会第十届微量元素营养学术会议论文摘要汇编[C];2009年

2 王金凤;;金黄色葡萄球菌酶的折叠、动态特性与功能——多维核磁共振研究[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年

3 余雁;易智彪;梁逸曾;;代谢组学中细胞破碎方法的研究[A];中国化学会第二十五届学术年会论文摘要集（下册）[C];2006年

4 马保臣;柴同杰;秦卓明;董玉兰;;乳腺炎金葡菌肠毒素和休克综合征毒素-1研究[A];中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集（上册）[C];2006年

5 胡杨波;王瑶;张勇;戴岳;杨宝玉;陈士云;;QS信号分子调控对金黄色葡萄球菌生物膜形成的影响[A];2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2006年

6 崔玉东;马金柱;张晶;朱战波;朴范泽;;S．aureus IsdB基因克隆和蛋白表达及免疫原性研究[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年

7 于维麟;朱元祺;;金黄色葡萄球菌肠毒素B的基因克隆及原核表达[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年

8 邱t焑，

本文编号：679490