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心脏特异表达绿色荧光斑马鱼模型的建立与评估

发布时间:2017-08-15 22:07

  本文关键词:心脏特异表达绿色荧光斑马鱼模型的建立与评估


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【摘要】:本课题组前期研究中,利用斑马鱼cmlc2(Cardiac myosin light chain 2)基因启动子构建了一个用于斑马鱼心脏组织特异表达外源基因的转基因表达载体pTol2-cmlc2-IRES-EGFP。文章利用该载体构建了一个稳定表达EGFP的转基因斑马鱼品系,并初步分析了EGFP的表达对该转基因斑马鱼品系的心脏发育和功能的影响。结果表明,在建立的转基因斑马鱼品系早期胚胎发育过程中,绿色荧光信号在心脏中特异表达,该表达模式与原位杂交分析的cmlc2的表达模式结果相同;该转基因斑马鱼品系的心脏形态及发育生长正常;进一步通过M-Mode分析心脏生理学功能的结果表明:该转基因品系心动周期、心率、收缩与舒张表面积及表面积缩短率等重要生理指标与正常野生型的斑马鱼对照组相比没有显著差别。以上结果表明该转基因品系中绿色荧光蛋白的表达对斑马鱼心脏的发育和功能没有影响。研究结果为进一步利用该载体建立外源目的基因转基因表达模型,研究心脏表达基因的功能奠定了重要基础。
【作者单位】: 湖南师范大学心脏发育研究中心 发育生物学与蛋白质组学教育部重点实验室;
【关键词】斑马鱼 转基因 EGFP Tol转座子
【基金】:国家自然科学基金项目(编号:81170088,30970245,3093005,31171402)资助
【分类号】:R-332
【正文快照】: cmlc2基因在心脏发育、胚胎和成体稳态的维持过程中发挥着着重要作用。cmlc2基因表达始于双边心脏中胚层,之后逐渐增强表达于心管,最终在分化的心室与心房均特异表达[1]。斑马鱼cmlc2启动子是构建心脏组织中特异表达目的基因的转基因斑马鱼模型理想启动子之一。Huang等[2]最

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