人乳头瘤病毒16型E2蛋白表达、纯化及抗血清制备

发布时间：2017-08-16 07:16

  本文关键词：人乳头瘤病毒16型E2蛋白表达、纯化及抗血清制备

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【摘要】：目的表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白,并制备小鼠抗HPV16 E2血清。方法采用PCR技术扩增HPV16E2基因,构建入pET21b载体,重组表达载体pET21b-HPV16E2经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达并鉴定表达产物。经纯化、变性和复性方法,制备可溶性HPV16 E2蛋白。免疫BALB/c小鼠制备抗血清,检测小鼠IFN-γ、CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、CD4/CD8比值和抗血清滴度变化。结果酶切和测序结果表明pET21b-HPV16 E2构建成功。表达蛋白相对分子质量(M_r)为42 000,Western blot法证明具有较高特异性。小鼠抗血清效价升高,CD4~+T细胞数量和CD4/CD8比值升高,小鼠IFN-γ无升高。结论成功制备可溶性HPV16 E2蛋白和小鼠抗HPV16 E2高效价的抗血清。
【作者单位】： 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室;哈尔滨医科大学附属第一医学院妇科;哈尔滨医科大学附属肿瘤医院妇科;
【关键词】： 人乳头瘤病毒型 E蛋白 表达 抗血清
【基金】：国家自然科学基金(81000726,30901706) 黑龙江省留学归国基金(LC2009C26)
【分类号】：R373.9
【正文快照】： 人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPY)目前分为100多型,根据感染部位分为皮肤型(P乳头瘤病毒)和黏膜型(a乳头瘤病毒)。黏膜型HPV被分为低危型和高危型。高危型HPV主要引起宫颈癌,还与乳腺癌、支气管癌、头颈鳞癌、喉癌和肛周生殖 器癌发生有关,其中,HPV16型是最普遍的型别

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