鸡蛋致敏蛋白免疫分析方法的建立

发布时间：2017-08-16 12:38

  本文关键词：鸡蛋致敏蛋白免疫分析方法的建立

  更多相关文章： 鸡蛋致敏蛋白 酶联免疫法 多克隆抗体

【摘要】：采用硫酸铵沉淀法和离子交换法分离纯化鸡蛋清得致敏蛋白后免疫兔子制备抗多克隆抗体,并建立快速、灵敏、特异性强的鸡蛋致敏蛋白酶联免疫检测方法。在优化条件下,鸡蛋致敏蛋白在1×10-4～10μg/mL质量浓度范围内与抑制率线性关系良好,其线性回归方程为y=0.74145+0.21692 lgC(r=0.9971),半抑制浓度(IC50)和最低检测限(IC10)分别为为77.076、1.104ng/mL;样品加标回收率在98.29%～101.55%之间;且抗鸡蛋致敏蛋白多克隆抗体对火鸡蛋蛋白、鸭蛋蛋白、鹅蛋蛋白均具有交叉反应,与花生、小麦蛋白无交叉反应;批内和批间变异系数分别为4.63%和5.49%,且可在4℃可保存6个月以上,能够快速灵敏检测食品中鸡蛋致敏蛋白的存在。
【作者单位】： 中国农业科学院农产品加工研究所农业部农产品加工与质量控制重点实验室;中国检验检疫科学研究院;中国计量学院生命科学学院;
【关键词】： 鸡蛋致敏蛋白 酶联免疫法 多克隆抗体
【基金】：“十一五”国家科技支撑计划项目(2006AA10Z449) 国家公益性行业科研专项(201103007)
【分类号】：R392
【正文快照】： 食物过敏反应又称食物超敏反应、食物变态反应(food allergy、food hypersensitivity),可引发一系列临床症状,如皮炎、哮喘、腹痛和腹泻等多种症状,严重的可导致休克。而在众多的食物过敏原中,鸡蛋是引起儿童及婴幼儿过敏的主要过敏原之一,据国外流行病学统计,在食物过敏儿童

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前7条

1 周淑红;;国外关于食品过敏标签的现状及启示[J];世界农业;2007年06期

2 黄峙,郭宝江;食品过敏原检测与评价技术研究进展[J];食品科学;2003年08期

3 佟平;高金燕;陈红兵;;鸡蛋清中主要过敏原的研究进展[J];食品科学;2007年08期

4 麻小娟;习斌蓉;陈红兵;高金燕;;一步法分离鸡蛋清中三种主要过敏原的研究[J];食品科学;2009年22期

5 顾可飞;李春红;高美须;潘家荣;;食物过敏原及检测技术的研究进展[J];食品科技;2006年08期

6 周超,潘红英,王秀敏;小儿鸡蛋过敏33例临床分析[J];中国妇幼保健;2005年17期

7 吴序栎;杨志华;刘志刚;吉坤美;;鸡蛋过敏原分离、鉴定与纯化[J];中国公共卫生;2009年01期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 张在军;多种食品过敏原体外快速检测技术的研究[D];暨南大学;2005年

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 董薇;曹际娟;邱驰;吴元华;;实时荧光PCR法检测致敏原鱼成分的研究[J];安徽农业科学;2009年23期

2 胡春們;徐振山;宋礼华;;抗体芯片技术在卵巢癌诊断中的应用进展[J];安徽医药;2009年08期

3 许军;黄渊涛;林小炜;柯维国;;国内外食品过敏原标签标注情况研究[J];现代农业科技;2009年13期

4 丛艳君;任发政;云战友;;β-乳球蛋白IgG抗原决定簇的识别[J];北京工商大学学报(自然科学版);2010年04期

5 易海涛;夏立新;刘芳;闫浩;黄钟;汤慕瑾;陈大玮;刘志刚;;克氏原螯虾主要变应原原肌球蛋白的一个片段区基因的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定[J];江西师范大学学报(自然科学版);2011年03期

6 徐岩;贡成良;薛仁宇;沈卫德;曹广力;;人胰岛素样生长因子Ⅰ型在E.coli和家蚕中的表达[J];常熟理工学院学报;2006年04期

7 陈文柱;何婀妮;曹广力;薛仁宇;陈淼;何泽;沈卫德;贡成良;;SARS-CoV S蛋白在大肠杆菌和家蚕中的表达[J];蚕业科学;2005年04期

8 涂雯婷;郑青亮;聂作明;陈健;于威;张耀洲;;家蚕含RRM保守结构域蛋白基因(Bmrrm)的克隆及序列分析与表达研究[J];蚕业科学;2009年03期

9 陆叶;郑小坚;薛仁宇;曹广力;沈卫德;贡成良;;构建稳定转化的BmN细胞表达人白介素-28A及表达产物的体外抗肿瘤活性[J];蚕业科学;2010年03期

10 林苏霞;王晓梅;刘志刚;曾梦雅;吴研;陈家杰;;大豆主要过敏原Gly m Bd 30K的抗原表位区基因的克隆表达、纯化及免疫原性鉴定[J];大豆科学;2010年02期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 哈益明;;辐照技术在保障食品安全中的作用和应用领域[A];中国核科学技术进展报告——中国核学会2009年学术年会论文集（第一卷·第8册）[C];2009年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 胡珊;荧光共振能量转移体系的研究及其在均相免疫分析中的应用[D];华中科技大学;2010年

2 杜少卿;硒蛋白S和硒蛋白K在内质网应激中的调节作用[D];华中科技大学;2010年

3 迟春萍;人铜锌超氧化物歧化酶在毕赤酵母中高表达及其中试工艺研究[D];吉林农业大学;2011年

4 佟平;鸡蛋卵转铁蛋白线性表位定位及热加工对其结构与过敏原性的影响[D];南昌大学;2011年

5 刘子泉;人源S100A1和S100B全基因合成、表达、单抗制备及其活性分析[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年

6 施婉君;2种蜜蜂和4种胡蜂溶血肽基因克隆与表达研究[D];浙江大学;2003年

7 丁剑冰;新疆细粒棘球蚴95抗原基因疫苗的免疫保护作用及其机制的研究[D];新疆医科大学;2003年

8 张春秀;基于抗原/抗体反应的生物检测技术及其应用研究[D];东南大学;2003年

9 郑大勇;完全人源化基因工程抗体anti-HBsAg Fab原核体系表达纯化工艺路线放大可行性研究[D];第一军医大学;2004年

10 师晓栋;玫瑰无须渻卵黄蛋白原和卵黄脂磷蛋白的纯化、鉴定、免疫分析和功能研究[D];中国海洋大学;2004年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 曲丽洁;用于动物性食品中莱克多巴胺快速检测的SPR技术研究[D];华中农业大学;2010年

2 费晶晶;两个家蚕FKBP12基因的研究[D];浙江理工大学;2010年

3 张学芳;家蚕Bmphb基因的表达及其功能初步研究[D];浙江理工大学;2010年

4 朱立明;家蚕TRAPα基因的表达与功能分析[D];浙江理工大学;2010年

5 杨光;家蚕BYB基因的表达及其功能分析[D];浙江理工大学;2010年

6 林雪;蛋白A的重组表达及重组菌的发酵过程优化[D];大连理工大学;2010年

7 王骏俊;鸡血清IgG的纯化及其单抗制备与鉴定[D];安徽农业大学;2010年

8 秦倩茹;抗卵清蛋白单克隆抗体的制备及卵清蛋白、醇溶蛋白ELISA检测方法的建立[D];中国海洋大学;2010年

9 李小燕;食物过敏原可视化检测抗体微阵列的构建[D];中国海洋大学;2010年

10 张先锋;口蹄疫病毒非结构蛋白基因3ABC、3AB、3A的克隆表达及3A蛋白间接ELISA方法的初步建立[D];新疆农业大学;2010年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 章如新,周卫东,李兆基;变应性鼻炎嗜碱粒细胞释放组胺能力的实验研究[J];第二军医大学学报;2000年12期

2 高波,刘志刚,邢苗,徐宏,罗时文,赖仞;美洲大蠊变应原CrPI的表达、纯化与免疫学特性鉴定[J];昆虫学报;2005年01期

3 杨勇,阚建全,赵国华,付陈梅;食物过敏与食物过敏原[J];粮食与油脂;2004年03期

4 谢华,何韶衡,陈萍,于润江;哮喘与非哮喘中肥大细胞脱颗粒的研究[J];免疫学杂志;2003年01期

5 杨慧,刘志刚,韩庆国,侯穗波,梁桂珍;艾蒿、青蒿花粉变应原组分的研究[J];免疫学杂志;2004年02期

6 陈文碧,王敏,王光西,张锡林,李燎;应用Dot-ELISA检测过敏性皮肤病患者过敏原的研究[J];皮肤病与性病;1999年04期

7 谷绒;车振明;万国福;;溶菌酶在食品工业中的应用[J];乳业科学与技术;2006年06期

8 聂凌鸿,周如金,宁正祥;食物过敏原研究进展[J];生命的化学;2002年05期

9 赵龙飞;徐亚军;;鸡蛋清中溶菌酶的应用性研究[J];食品工业;2006年03期

10 黄峙,郭宝江;食品过敏原检测与评价技术研究进展[J];食品科学;2003年08期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 张燕,薛耀明,郭爱林,张文敏;GST-IRS-4原核表达载体的构建、表达及抗GST-IRS4多克隆抗体的制备[J];实用医学杂志;2005年05期

2 吴镝,许国双,陈香美,师锁柱,洪权,张萍,吕扬;抗人有机阴离子转运蛋白4多克隆抗体的制备及其在肾脏的定位研究[J];中国中西医结合肾病杂志;2005年06期

3 孙玉宁,靳更林,李燕,寿成超;人Norpeg蛋白的原核表达及其抗体的制备[J];宁夏医学院学报;2005年04期

4 黄柯;孟元光;韩为东;赵亚力;李琦;宋磊;;LRP16基因的多克隆抗体制备及表达的探索[J];军医进修学院学报;2007年02期

5 伍银桥;王孟薇;吴本俨;王刚石;尤纬缔;王卫华;;抗人胃癌相关蛋白GCRG224多克隆抗体的制备、鉴定及初步应用[J];细胞与分子免疫学杂志;2009年08期

6 杜洪桥;朱蓉;徐葛林;严家新;;两种亲和层析方法纯化兔抗CHO细胞蛋白多克隆抗体的比较[J];中国生物制品学杂志;2011年08期

7 安薇;徐霞;;人脂联素球状结构域基因的原核表达及多克隆抗体的制备[J];中国免疫学杂志;2011年09期

8 胡文森 ,吴明杰;~(99m)Tc单克隆抗体的放射免疫显象:临床研究[J];国际放射医学核医学杂志;1986年01期

9 周明华,任峰,赵丽萍,邱鹏新;RGNTF单抗与多抗的特性和抑制作用(简报)[J];实验生物学报;1991年03期

10 姚敏捷,黄汉朝,王新成,寇丽筠;人Ⅳ型胶原单、多克隆抗体的制备及其临床应用[J];第四军医大学吉林军医学院学报;1995年03期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 张敏;池霞;洪琴;童梅玲;郭锡熔;;人类肥胖相关新基因LYRM1多克隆抗体的制备及鉴定[A];中华医学会第十五次全国儿科学术大会论文汇编（上册）[C];2010年

2 杨敏;王锁英;许小朋;马洁;毛朝明;仝佳;邱谷风;胡正军;王胜军;邵启祥;许化溪;;人T-bet基因的表达、纯化及其多克隆抗体的制备[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];2006年

3 陈波;钱，

本文编号：683348