C2C12-GLUT4HA骨骼肌细胞株的筛选

发布时间：2017-08-16 15:05

  本文关键词：C2C12-GLUT4HA骨骼肌细胞株的筛选

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【摘要】：目的筛选过表达带有HA表位的葡萄糖转运子4(GLUT4HA)且具有收缩能力的C2C12骨骼肌细胞株。方法建立稳定过表达GLUT4HA的C2C12骨骼肌细胞株,从中挑选出23个克隆。用光镜观察各个克隆分化为多核肌管的能力和响应电脉冲刺激(EPS)的收缩能力,并用免疫印迹法检测各克隆中GLUT4HA蛋白的表达水平,筛选出分化良好、响应EPS收缩且高表达GLUT4HA的细胞株。将各细胞株进一步分为胰岛素组及其对照组、EPS组及其对照组,用酶联免疫吸附(ELISA)法测定各组细胞膜上GLUT4HA的含量(转位)。结果在选出的23个克隆中,克隆17的GLUT4HA表达量较高,分化和收缩能力良好,且在胰岛素和EPS后GLUT4转位显著升高。结论本研究建立了过表达GLUT4HA的具有收缩能力的C2C12-GLUT4HA骨骼肌细胞株,可用于研究胰岛素调节GLUT4转位和收缩调节GLUT4转位的机制。
【作者单位】： 天津医科大学免疫教研室;天津中医药大学第一附属医院检验科;
【关键词】： 肌骨骼 葡萄糖转运体型 细胞培养的 胰岛素 肌收缩 电脉冲刺激
【基金】：国家自然科学基金资助项目(项目编号:81170740);国家自然科学基金委员会国际合作与交流项目(项目编号:81161120545)
【分类号】：R392
【正文快照】： 骨骼肌是摄取葡萄糖维持血糖稳态的重要器官。胰岛素和骨骼肌收缩均能促进葡萄糖转运子4(GLUT4)从胞内囊泡转运到胞膜上,增加葡萄糖摄取[1]。相比胰岛素信号机制,人们对运动/肌肉收缩促进葡萄糖摄取的机制了解较少。体外骨骼肌细胞培养技术以其操作简单、费用低廉、培养的细

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 于俊娜;牛文彦;;CaMKⅡ在收缩促进骨骼肌细胞GLUT4转位中的作用[J];天津医药;2011年06期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李厚文;杨永瑾;;树，

本文编号：683930