小鼠胰岛移植模型的系列改进

发布时间：2017-08-19 12:47

  本文关键词：小鼠胰岛移植模型的系列改进

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【摘要】：目的改进小鼠胰岛的分离、纯化及移植方法。方法基于传统小鼠胰岛移植模型,优化胶原酶消化液配方,标准化胰腺组织的消化过程,改用Histopaque 1077作为纯化胰岛的离心介质,改进胰岛制备物输送至肾包膜下的方法;相差显微镜下观察所获胰岛的形态,用双硫腙(DTZ)对胰岛进行特异性染色并计算胰岛产量及纯度;采用吖啶橙-碘化丙啶(AO-PI)染色法观察胰岛活性;制备糖尿病小鼠模型,设计胰岛移植组(10只)及假手术对照组(10只),检验胰岛移植物治疗糖尿病的效果。结果健康胰岛有完整包膜,DTZ染色后呈猩红色,平均每只小鼠可收获(200±30)个胰岛团,终纯度(90±5)%;荧光显微镜下,AO-PI染色后,正常胰岛显示绿色,死亡胰岛显示红色,胰岛存活率为(93±3)%;糖尿病小鼠接受同系胰岛移植后,90%的小鼠逆转糖尿病,对照组小鼠的血糖无改善。结论成功改进胰岛移植模型,简化和标准化小鼠胰岛的分离、纯化及移植过程,有助于该模型成为胰岛移植研究的常规方法。
【作者单位】： 华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所 卫生部器官移植重点实验室 器官移植教育部重点实验室;中南大学湘雅医学院附属湘雅医院内分泌科;广东东莞太平人民医院核医学科;
【关键词】： 胰岛 分离 纯化 小鼠 胰岛移植
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81072441)
【分类号】：R-332
【正文快照】： 胰岛移植作为治疗l型糖尿病的一种有效方法,应用前景良好。近年来,临床胰岛移植虽然取得较大进展,但仍存在许多困难。尤其是现有提取技术所能收获的胰岛数量和质量偏低,严重限制了胰岛移植的广泛应用。单个成人胰腺中含有30万~ 150万个胰岛,而现有方法仅能获得其总量的30%~50

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本文编号：700821