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HBx介导miR-221上调-ERα下调致HepG2细胞恶性增殖

发布时间:2017-08-19 22:27

  本文关键词:HBx介导miR-221上调-ERα下调致HepG2细胞恶性增殖


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【摘要】:目的探讨microRNA221(miR-221)在乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染相关性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的促癌功能以及HBV基因编码的X蛋白(HBx)诱导miR-221上调促进HepG2细胞异常增殖的分子机制。方法重组HBx腺病毒(Ad-HBx)感染人肝癌HepG2细胞,荧光定量PCR检测HepG2-HBx细胞中miR-221和ERα mRNA表达的变化;流式细胞术检测细胞周期,Western blot检测雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)蛋白表达水平变化,分别用miR-221 mimic和miR-221 inhibitor转染HepG2细胞后,荧光定量PCR检测HepG2-HBx细胞中miR-221和ERαmRNA表达变化;Western blot检测ERα蛋白水平表达变化。结果 RT-PCR实验证实,adv-HBx感染HepG2细胞后,HBx在HepG2细胞中高效表达;感染48 h后,HBx蛋白可显著上调miR-221[(495.84±61.16)vs(239.25±21.15),P0.05]并抑制ERα蛋白[(0.24±0.01)vs(0.61±0.02),P0.05]的表达水平,同时促进HepG2细胞异常增殖[(31.73±3.53)%vs(56.08±1.56)%,P=0.01]。miRNA转染实验及Western blot证实:miR-221抑制ERα蛋白的表达(P0.05),miR-221抑制剂促进ERα蛋白的表达(P0.05)。结论 HBx可能通过上调miR-221进而下调ERα对肝癌的保护性效应而促进肝癌细胞异常增殖,靶向miR-221的策略具有抑制肝癌细胞增殖的治疗潜能。
【作者单位】: 重庆医科大学附属第一医院检验科;
【关键词】HBx蛋白 miR- 雌激素受体α HepG细胞 增殖
【基金】:国家自然科学基金(81071621,30973378,81101826,81272545) 国家临床重点专科建设项目[财社(2010)305号] 重庆市自然科学基金(2010BB5390) 重庆市卫生局课题(2010-2-090)~~
【分类号】:R394.3
【正文快照】: 慢性乙型肝炎病毒(hepatititis B virus,HBV)与肝细胞肝癌发生的关系密切,是肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)发生的主要危险因素之一[1]。在我国,慢性HBV感染已成为HCC的首要原因,各种遗传学和表观遗传学失调均可致HBV感染相关性肝癌[2-3]。HBV基因编码的X蛋白(HBx)作

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10 张s,

本文编号:703322


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