不同分化阶段树突状细胞骨架结合蛋白表达变化的研究

发布时间：2017-08-25 03:26

  本文关键词：不同分化阶段树突状细胞骨架结合蛋白表达变化的研究

  更多相关文章： 树突状细胞 细胞骨架结合蛋白 Real-time PCR mRNA

【摘要】：目的:树突状细胞(dendritic cells,DCs)被认为是目前功能最为强大的抗原提呈细胞,在启动和放大固有免疫和适应性免疫应答方面发挥着关键作用。不同分化阶段DCs运动能力不同,可导致免疫应答结果的不同。因此,研究不同分化阶段树突状细胞重要细胞骨架结合蛋白的表达变化,为深入研究DCs运动能力和提高基于过继回输DCs的抗肿瘤免疫治疗疗效提供理论依据。方法:外周血单个核细胞来源的单核细胞,在体外经重组人白介素-4(recombinant human interleukin-4,rh IL-4)和重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,rh GM-CSF)诱导培养5天获得未成熟DCs(immature dendritic cells,im DCs),继续经肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子和重组人白细胞介素-4诱导培养3天后分化为成熟树突状细胞(mature dendritic cells,m DCs)。分别提取不同分化阶段DCs的总蛋白和总RNA,实时定量PCR(Real-time q PCR)和蛋白质芯片检测细胞骨架结合蛋白的基因和蛋白水平的表达变化。结果:单核细胞经im DCs向m DCs分化的过程中,一些肌动蛋白微丝的单体隔离蛋白、加帽蛋白、横连蛋白、解聚蛋白、成核蛋白和膜结合蛋白以及微管结合蛋白和马达蛋白在基因和蛋白水平发生了不同程度的上调或下调。部分结果与蛋白芯片分析结果一致。结论:总之,本研究发现一些DCs的骨架结合蛋白在其不同的分化阶段表现出不同的表达水平,分别涉及细胞的骨架重塑、迁移、粘附、吞噬和变形等功能,说明DCs的结构和功能受到这些蛋白的协同作用和精密调控,但是具体机制还需要深入研究,这对深入理解DCs的免疫学功能具有重要意义。
【关键词】：树突状细胞 细胞骨架结合蛋白 Real-time PCR mRNA
【学位授予单位】：贵州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R392
【目录】：

• 中文摘要4-5
• 英文摘要5-8
• 英文缩略词表8-9
• 0 引言9-13
• 1 材料与方法13-25
• 2 结果25-42
• 3 讨论42-49
• 4 结论49-50
• 参考文献50-55
• 综述55-61
• 参考文献59-61
• 作者简历61-62
• 致谢62-63
• 学位论文数据集63

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本文编号：734794