疏肝补肾法对慢性应激模型小鼠卵泡质量的调节及作用研究

发布时间：2017-08-27 07:26

  本文关键词：疏肝补肾法对慢性应激模型小鼠卵泡质量的调节及作用研究

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【摘要】：目的:本课题拟在前期工作中观察到慢性应激可引起下丘脑-垂体-卵巢轴功能紊乱及中药的改善作用基础上,通过实验研究,结合中医理论,以慢性应激肝郁小鼠模型为研究对象,以疏肝补肾中药进行干预,采用细胞、胚胎体外培养技术、分子生物学等技术,探讨慢性应激对卵细胞质量的影响及疏肝补肾中药的调节作用,揭示慢性应激影响胚胎发育和着床的作用机制及中药的作用机理,并为其有效防治提供新方法和治疗新思路。方法:将132只雌性Wistar小鼠随机分为6组,每组小鼠数量为22只,即空白对照组、应激模型组、逍遥丸组、逍遥丸加左归丸组、疏肝补肾中药低、高剂量组,除空白组外其余各组均接受21天长期应激刺激,在刺激期间各组分别灌药,造模成功后,在造模第20日注射hMG,第22日注射hCG。注射h CG次日,每组分别随机取11只用酶联免疫分析法检测血液中的FSH,LH,E_2含量,用免疫酶细胞化学技术观察卵巢局部TNF-α(血清肿瘤坏死因子-α)含量,在注射HCG当晚,各组剩余小鼠按雌雄比例二比一合笼喂养,次日上午检栓,发现阴道栓定为妊娠第一天。在受孕第二天脱颈处死,在解剖显微镜下将受精卵吸出,观察96小时内受精卵体外孵化情况。结果:(1)中药高、低剂量组、逍遥丸组、逍加左组小鼠刺激后体重增长状况与模型组有显著差异,中药高剂量组、逍加左组体重增长速度与空白组接近。(2)与模型组相比,中药高、低剂量组、逍遥丸组、逍加左组的行为学指标有差异,其中中药高剂量组、逍加左组差异更明显(P0.01)与空白组接近。(3)与模型组相比,疏肝补肾方高剂量组、逍遥丸组、逍加左组小鼠卵巢TNF-α水平显著降低(P0.01)。(4)模型组小鼠E2水平明显高于其他各组(P0.01),FSH降低,(P0.05)各组小鼠LH水平无明显变化(P0.05)。(5)受精卵孵化率逍加左丸组最高,中药高剂量组、空白组次之,模型组最低。结论:1.疏肝补肾中药能改善慢性应激小鼠的行为学指标,提高小鼠血清FSH水平,降低E2水平,降低未成年小鼠卵巢局部TNF-α水平,改善卵巢局部微环境。2.疏肝补肾方具有改善慢性应激雌性小鼠慢性应激状态和调节卵巢局部活性物质的作用,提高囊胚孵化率,改善卵泡质量。3.本实验揭示了慢性应激影响卵子质量的病理机制及中药的作用机理,为其有效防治提供新方法和治疗新思路。
【关键词】：慢性应激 卵子质量 血清肿瘤坏死因子-α 疏肝补肾
【学位授予单位】：河南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R285.5;R-332
【目录】：

• 摘要5-6
• Abstract6-8
• 前言8-11
• 材料与方法11-16
• 1 实验材料11-12
• 2 实验方法12-15
• 3 统计学处理15-16
• 实验结果16-20
• 1 各组小鼠刺激前体重及行为学指标16
• 2 各组小鼠刺激后体重及行为学指标比较16-18
• 3 各组小鼠血清指标比较18-19
• 4 各组小鼠刺激后TNF-α指标比较19
• 5 各组小鼠刺激后囊胚孵化情况19-20
• 理论探讨20-29
• 1 祖国医学对肝郁与生殖的认识20-21
• 2 现代医学对慢性应激的认识和探讨21-23
• 3 导师对肝郁的认识和学术思想探讨23-26
• 4 本方的现代药理学研究26-27
• 5 实验结果分析及作用机制探讨27-29
• 结论29-30
• 致谢30-31
• 参考文献31-33
• 附录33-41

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