人肠道病毒71型3A蛋白的原核表达及抗体制备

发布时间：2017-08-27 10:01

  本文关键词：人肠道病毒71型3A蛋白的原核表达及抗体制备

  更多相关文章： 人肠道病毒型 A蛋白 多克隆抗体

【摘要】：目的构建人肠道病毒71型3A基因原核表达质粒,制备重组3A蛋白及其抗体。方法 PCR方法扩增人肠道病毒71型3A基因,构建原核表达质粒PET28a-3A并转化大肠埃希菌,诱导表达3A重组蛋白,免疫小鼠制备3A蛋白抗体。通过免疫荧光和Western blot方法鉴定抗体特异性。结果成功构建了PET28a-3A原核表达质粒并表达了3A重组蛋白,3A蛋白以包涵体的形式存在。细胞免疫荧光和Western blot检测显示,制备的鼠源3A蛋白抗体可识别真核表达的EGFP-3A融合蛋白以及EV71感染细胞表达的3A蛋白。结论成功构建了人肠道71型3A基因原核表达质粒,利用该质粒表达的重组蛋白成功制备了特异性的3A蛋白的鼠源抗体。
【作者单位】： 华中师范大学生命科学院;
【关键词】： 人肠道病毒型 A蛋白 多克隆抗体
【基金】：华中师范大学中央高校基本科研业务费项目资助(No.CCNU10A01018)
【分类号】：R373.2
【正文快照】： ***肠道病毒71型(Enterovirus 71)属于小RNA病毒科肠道病毒属。EV71感染可致人手足口病、疱疹性咽峡炎、无菌性脑膜炎、脑炎和脊髓灰质炎样的麻痹性疾病等多种与神经系统相关的疾病,主要在4岁以下婴幼儿中引起疾病症状。病毒基因组为约7 400个核苷酸的具有感染性的单链正义RNA

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 薛青红,刘湘涛,张彦明,韩雪清,谢庆阁;口蹄疫病毒3A基因在大肠杆菌中的高效表达[J];微生物学报;2002年05期

2 牛文柯;林艺;丁淑军;裴耀文;王连森;王显军;姜宝法;;山东省EV71和CoxA16所致手足口病重症病例流行病学及临床特征分析[J];中国病原生物学杂志;2012年02期

3 吕莉琨;李力;杨东靖;李佳萌;董晓春;苏旭;;2011年天津市手足口病病原检测与基因特征分析[J];中国病原生物学杂志;2012年08期

4 许华茹;李战;成洪旗;;2010年济南市手足口病流行病学和病原学特征分析[J];中国病原生物学杂志;2013年01期

5 徐北霜;王国强;董健;孟红;;2010～2012年德州市11县市区手足口病病原学特征分析[J];中国病原生物学杂志;2013年02期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李峰;;牲畜口蹄疫疫苗研究进展及其应用[J];福建畜牧兽医;2007年04期

2 冯金瑞;常惠芸;丛国正;独军政;陈前锋;薛慧文;;C型口蹄疫病毒鼠源毒株3A基因的克隆及序列分析[J];甘肃农业大学学报;2008年01期

3 刘泽;刘红雁;杨汝松;曾丽萍;;玉溪市2010—2011年重症手足口病调查分析[J];传染病信息;2012年04期

4 黄俊辉;梁勇;;疫学因果关系初探——以食品卫生犯罪为视角[J];长江论坛;2013年03期

5 黄俊辉;;食品卫生犯罪中疫学因果关系适用之探讨[J];重庆广播电视大学学报;2013年04期

6 陈莉;袁虹;袁静;刘艳;曾丽娇;郑晓君;;496例肠道病毒71(EV71)型手足口病临床特征分析[J];海南医学院学报;2013年04期

7 陈润莉;曾华书;潘瑞胤;周海涛;张勇;段利娜;;深圳市583例儿童血清CoxA16抗体检测分析[J];中国热带医学;2013年05期

8 张荣强;侯佩强;倪楠;张爱华;杨会利;;泰安市2010～2012年手足口病不同标本检测结果分析[J];泰山医学院学报;2013年04期

9 徐全武,申涛,马雪峰;口蹄疫疫苗研究进展[J];新疆畜牧业;2003年03期

10 信爱国,朱建波,赵文华,李乐,张念祖;口蹄疫病毒O/Laos/00株非结构蛋白3A基因特征分析[J];中国预防兽医学报;2005年04期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 田晓灵;内蒙古自治区手足口病主要病原分子生物学特征和人肠道病毒71型致病病理学研究[D];内蒙古农业大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前9条

1 任武泽;FMD鉴别诊断抗原3ABC的原核表达与纯化及RNAi抑制FMDV复制的初步研究[D];西北农林科技大学;2004年

2 李任峰;检测口蹄疫病毒单抗ELISA方法的建立及口蹄疫病毒多抗原基因的融合表达[D];华中农业大学;2005年

3 刘萍;口蹄疫病毒3C基因的真核表达及其诱导宿主细胞凋亡的研究[D];甘肃农业大学;2007年

4 张广宇;口蹄疫病毒3A蛋白结构预测及功能分析[D];中国农业科学院;2007年

5 朱丽杰;一株O型口蹄疫病毒分离株的全基因序列分析[D];东北农业大学;2007年

6 蔡利军;口蹄疫非结构蛋白3ABC单克隆抗体的制备及初步应用[D];华中农业大学;2007年

7 师永霞;黄芪多糖免疫增效作用的研究[D];甘肃农业大学;2008年

8 韩晓荣;AsiaⅠ型口蹄疫双效表达载体构建及表达[D];甘肃农业大学;2008年

9 项海涛;AsiaⅠ型口蹄疫基因治疗与基因免疫双功能疫苗载体的构建[D];甘肃农业大学;2009年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 吴家兵;方益荣;王建军;张进;胡岱霖;曹明华;;安徽省2008年手足口病流行病学分析[J];安徽预防医学杂志;2010年02期

2 崔爱利,许文波,李秀珠,胡家瑜,凌华,唐伟,杨智宏,张燕,陈立,Hiroyuki Shimizu;肠道病毒71型的RT-PCR诊断及基因特征[J];病毒学报;2004年02期

3 陈风阳;;邢台地区2010至2011年手足口病病原体流行特征分析[J];河北医药;2012年09期

4 何家鑫,沈晓娜;手足口病流行特点及其防治[J];海峡预防医学杂志;2001年03期

5 许文波;檀晓娟;;手足口病:中国儿童传染病防控面临的新挑战[J];疾病监测;2009年09期

6 李力;杨东靖;吕莉琨;苏旭;李佳萌;董晓春;;2010年天津市手足口病病原学与分子流行病学分析[J];疾病监测;2011年08期

7 金玉明;马焱;黄芳;曾昭长;孙莲英;曾祥洁;李丹丹;贾鹏本;冯芳丽;;海南省2008年手足口病流行特征分析[J];中国热带医学;2009年12期

8 张九菊;张少丹;张会丰;田晓瑜;王晓凯;荣潇;;河北省2008年手足口病的流行病学分析[J];实用儿科临床杂志;2010年22期

9 张晓玲;俞慧菊;余曜;宋志刚;管文彩;马文艺;胡芸文;;2010年上海部分地区440例手足口病病例的病原谱及分子流行病学分析[J];微生物与感染;2011年04期

10 许华茹,杨林,于秋燕;济南市2003年手足口病发病率调查[J];现代预防医学;2004年04期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 郭雪艳;时永全;翟惠虹;孙力;刘理礼;韩霜;雷婷;樊代明;;人核糖体蛋白S13的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备[J];细胞与分子免疫学杂志;2007年04期

2 潘丽晶;李朝飞;尹崇;吕雷;庞义;;杆状病毒SpltMNPV gp41基因的克隆、表达及抗体制备[J];农业生物技术学报;2004年06期

3 郭玉静;许均华;赵舟宙;朱晨刚;;人早胚发育相关蛋白ZNF268的抗体制备[J];氨基酸和生物资源;2007年02期

4 黄海丽;郑文岭;赵蕊;严启涛;蔡翠霞;张宝;马文丽;;人FBXO31蛋白的原核表达及抗体制备[J];中国生物工程杂志;2010年07期

5 高华;高旭;姜成刚;赵立平;马学恩;周建华;;中国株马传染性贫血病病毒S2基因的原核表达及其多克隆抗体制备[J];中国预防兽医学报;2009年07期

6 谭才邓;李静;李峰;庄楚雄;;水稻PDK2基因原核表达和多克隆抗体制备[J];基因组学与应用生物学;2009年06期

7 黄美容;黄健;王虹;徐绣宇;王鹏;尹一兵;胥文春;;脂蛋白相关磷脂酶A2的原核表达及多克隆抗体的制备[J];中国生物制品学杂志;2011年04期

8 商汉桥;罗晓松;邹世平;伍晓雄;吴小平;龙良启;;鲤胰岛素样生长因子Ⅱ的克隆表达与抗体制备[J];淡水渔业;2007年06期

9 俞俞;邢卫锋;周茜;;拟南芥转录因子DYT1的原核表达与多克隆抗体制备[J];西北植物学报;2011年02期

10 郑梅竹;潘风光;邹亚学;孙莹;崔文t，

本文编号：745229