艾灸对AD模型大鼠海马区神经元凋亡的影响

发布时间：2017-08-28 21:29

  本文关键词：艾灸对AD模型大鼠海马区神经元凋亡的影响

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【摘要】：目的通过艾灸干预阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)模型大鼠,观察艾灸干预对AD模型大鼠学习记忆能力,大脑海马区凋亡相关基因B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相关蛋白X(Bcl-2 association x protein,Bax)表达的情况,以及海马区β淀粉样蛋白(amyloidβprotein,Aβ)42、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)表达的情况,来探讨艾灸对AD大鼠大脑海马内神经元细胞凋亡的调控作用,从而为艾灸治疗AD提供进一步的理论支持。方法将60只2月龄SD雄性大鼠,SPF级,300g(±30),适应性喂养3d天后,按随机数字表法分为空白组、假手术组、模型组、西药组和艾灸组,每组12只。空白组常规喂养不做任何处置,假手术组双侧侧脑室注射柠檬酸/柠檬酸钠缓冲液,其余各组则采用双侧侧脑室注射STZ构建AD模型。造模完成后对大鼠再次进行Morris水迷宫筛选,与造模前相比,平均逃避潜伏期延长、穿越平台次数下降为造模成功,并除去死亡大鼠2只,最后纳入实验的大鼠为空白组12只、假手术组12只、模型组11只、西药组11只、艾灸组12只。艾灸组取“百会”、“长强”、“关元”、“命门”,悬灸距皮肤3cm,长强、命门、关元各10min,百会3min,隔2d灸,10次/疗程,共30d;西药对照组给予盐酸多奈哌齐混悬液进行灌胃,其中盐酸多奈哌齐按0.45mg/kg计算用药量,每日1次,每次灌胃不超过3ml,共30次;空白组、假手术组、模型组不处理。干预结束后,采用Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力的变化;采用免疫组化法检测各组大鼠脑内Aβ42的表达;采用Western Blot检测大脑海马组织中凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的情况;采用双抗体夹心法(ELISA)检测IL-1β在各组大鼠海马区的表达。结果一、Morris水迷宫检测结果与假手术组比较,空白组大鼠的水迷宫结果无显著差异(P0.05),模型组大鼠平均潜伏期明显延长,平均穿越平台的次数明显下降(P0.05);与模型组比较,西药组和艾灸组大鼠平均潜伏期明显缩短,平均穿越平台的次数明显增加(P0.05);而西药组与艾灸组之间无差异(P0.05)。二、免疫组化检测结果与假手术组比较,空白组大鼠海马区Aβ42、Bcl-2的阳性表达无显著差异(P0.05),模型组大鼠海马区Aβ42的阳性表达增加(P0.05);与模型组比较,西药组和艾灸组大鼠海马区Aβ42的阳性表达减少(P0.05);而与西药组对比,艾灸组大鼠海马区Aβ42的阳性减少(P0.05)。三、Western Blot的检测结果空白组与假手术组大脑海马组织中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达无显著性差异(P0.05);模型组的Bcl-2相对表达量低于假手术组(P0.05),Bax的相对表达量高于假手术组(P0.05);西药组和艾灸组Bcl-2的相对表达量高于模型组(P0.05),Bax的相对表达量高低模型组(P0.05);艾灸组Bcl-2的表达量高于西药组,Bax的相对表达量低于西药组(P0.05)。四、双抗体夹心法的检测结果空白组与假手术组大鼠海马区IL-1β的表达无显著性差异(P0.05);与假手术组相比,模型组的IL-1β的相对表达量升高(P0.05);与模型组相比,西药组与艾灸组IL-1β的相对表达量降低(P0.05);而艾灸组与西药组相比IL-1β的表达减少(P0.05)。结论以侧脑室注射STZ方法造模,可以使AD模型大鼠的学习记忆能力减退,Aβ42沉积,炎症因子(IL-1β)表达增加,促凋亡蛋白Bax表达升高,抗凋亡蛋白Bcl-2表达下降,神经元细胞凋亡。西药盐酸多奈哌齐和艾灸对AD模型大鼠具有治疗作用,均能改善AD模型大鼠学习记忆能力,减少海马区Aβ的异常沉积、IL-1β炎症因子和Bax蛋白的表达,以及增加Bcl-2的表达,促进海马区神经元的再生,但艾灸的效果要优于盐酸多奈哌齐。艾灸干预能提高AD大鼠的学习记忆能力,其机制可能是调节了Aβ沉积导致的细胞凋亡的发生,进而保护海马区神经元。
【关键词】：阿尔茨海默病 艾灸 链脲佐菌素 Aβ42 白介素1β B淋巴细胞瘤-2基因 Bcl-2相关蛋白X
【学位授予单位】：锦州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R245;R-332
【目录】：

• 中文论著摘要4-7
• 英文论著摘要7-10
• 英文缩略语表10-11
• 前言11-14
• 实验材料与方法14-27
• 结果27-32
• 讨论32-39
• 结论39-40
• 本研究创新性的自我评价40-41
• 参考文献41-49
• 附录49-62
• 一、文献综述 神经元凋亡在阿尔茨海默病发病机制中的作用49-58
• 参考文献54-58
• 二、在学期间科研成绩58-59
• 三、致谢59-60
• 四、个人简介60-61
• 附图61-62

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本文编号：749596