GST-HDAC4融合蛋白载体的构建及其蛋白表达

发布时间：2017-08-31 09:08

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【摘要】：目的构建人HDAC4蛋白与谷胱甘肽转移酶(GST)重组的融合蛋白原核表达载体并进行表达和纯化。方法用EcoRI单酶切pcDNA3.1-HDAC4质粒,得到hHDAC4全长编码序列,并将其克隆至原核表达载体pGEX-5X-1构建成新载体GST-HDAC4,经鉴定完全正确后转化大肠埃希菌BL21,通过异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并纯化获得目的蛋白。Western blot检测重组质粒的表达。结果酶切鉴定和测序结果显示,GST-HDAC4融合蛋白原核表达载体构建成功。考马斯亮蓝染色和Western blot结果显示,成功获得有生物活性的GST-HDAC4融合蛋白。结论成功构建了HDAC4原核表达载体,获得有生物活性的GST-HDAC4蛋白。
【作者单位】： 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室 教育部医学细胞生物学重点实验室;
【关键词】： GST-HDAC 原核表达 融合蛋白
【基金】：国家自然科学基金资助项目(30900752,31271389)
【分类号】：R341
【正文快照】： Construction of GST-HDAC4 Fusion Protein Vector and Its Protein Expression组蛋白去乙酰化酶(histonedeacetylases,HDACs)是真核细胞中的一类重要蛋白酶,参与染色质的结构修饰和基因表达调控,在肿瘤的发生和发展中起重要作用[1]。通过组蛋白去乙酰化酶抑制剂(his-tone de

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

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【共引文献】

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【相似文献】

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本文编号：764688