FHL2蛋白与心脏Kv1.5钾通道相互作用的研究

发布时间：2017-09-01 10:40

  本文关键词：FHL2蛋白与心脏Kv1.5钾通道相互作用的研究

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【摘要】：目的目前认为KCNA5通道蛋白是治疗房颤的一个理想靶点,文中旨在验证FHL2蛋白与KCNA5基因编码的心脏Kv1.5钾通道是否存在相互作用。方法①质粒构建:应用PCR法构建质粒pcDNA3.1/myc-His C-KCNA5和pcDNA3.0-FHL2;②基因转染:应用Lipofectamine 2000将pcDNA3.1/myc-His C-KCNA5质粒和pcDNA3.0-FHL2质粒共转染HEK293细胞;③免疫共沉淀:应用抗FHL2抗体和Protein A/G Plus-Agarose沉淀目的蛋白,应用抗Myc抗体进行Western blot分析;④免疫荧光细胞化学分析:应用抗FHL2一抗和标记有FITC的二抗检测FHL2蛋白,应用抗Myc一抗和标记有Cy3的二抗检测KCNA5-Myc融合蛋白。结果①酶切和测序结果表明质粒pcDNA3.1/myc-His C-KCNA5和pcDNA3.0-FHL2构建正确;②抗FHL2抗体能够将KCNA5从总蛋白中沉淀下来;③KCNA5蛋白和FHL2蛋白共定位于细胞膜上。结论初步证实FHL2蛋白与KCNA5蛋白存在相互作用。
【作者单位】： 广东省人民医院、广东省心血管病研究所心内科;
【关键词】： FHL KCNA 钾通道 免疫共沉淀 免疫荧光细胞化学
【基金】：国家自然科学基金(81070151) 广东省自然科学基金(S2012010009324)
【分类号】：R33
【正文快照】： 0引言KCNA5基因编码的Kv1.5钾通道介导了心房的超速激活延迟整流钾电流(ultrarapidly activatingdelayed rectifier potassium current,Ikur)[1-2]。由于房颤的发生发展与心房Ikur的异常存在密切关系,因此目前认为KCNA5通道蛋白是治疗房颤的一个理想靶点[3-4]。新近研究发现FH

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本文编号：771623