β2-spectrin的siRNA对AML-12肝细胞增殖特性的影响

发布时间：2017-09-01 19:45

  本文关键词：β2-spectrin的siRNA对AML-12肝细胞增殖特性的影响

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【摘要】：目的应用特异性siRNA干扰小鼠肝细胞株AML-12中β2-spectrin表达,检测AML-12细胞增殖凋亡以及细胞周期的改变。方法化学合成β2-spectrin特异性siRNA,分别转染AML-12细胞,荧光定量PCR和Western blot确定其抑制效果。AML-12细胞经TGF-β细胞因子处理4h后,转染β2-spectrin特异性siRNA,48h后,BrdU标记法以及流式细胞术检测β2-spectrin沉默前后AML-12细胞增殖、凋亡以及周期变化;共聚焦技术检测干扰β2-spectrin表达对TGF-β/Smad信号通路中Smad3、Smad4核定位的影响。结果 siRNA可以高效特异沉默β2-spectrin的表达。流式细胞术检测显示,β2-spectrin沉默促进AML-12细胞增殖,抑制凋亡,S期细胞比例显著升高。免疫荧光结果显示,TGF-β处理后,Smad3、Smad4表达定位于细胞核,沉默β2-spectrin干扰Smad3、Smad4细胞核内定位。结论沉默β2-spectrin的表达促进AML-12增殖,抑制凋亡,促进细胞向S期转化。其机制可能是通过干扰Smad3、Smad4核定位而抑制TGF-β/Smad信号通路,进而发挥诱导凋亡效应。
【作者单位】： 华中科技大学同济医学院附属协和医院消化内科;华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科;华中科技大学同济医学院附属协和医院血液内科;
【关键词】： β-spectrin AML-细胞株 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.30600277)
【分类号】：R363
【正文快照】： β2-spectrin又名胚肝血影蛋白(embryonic liverfodrin,ELF),最早由Mishra等[1]在胚胎小鼠肝脏中发现并鉴定,其位于小鼠11号染色体D11XRF到D11BIR6区之间。β2-spectrin是β血影蛋白家族的成员之一,它对于维持细胞形态、细胞极性,以及细胞膜上不同功能区域的形成有着重要的作

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

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2 吴文杰;王密;刘萍;阳乔;唐望先;;脂筏在CB2受体介导的内源性大麻素AEA抑制大鼠肝星状细胞增殖活性中的作用[J];华中科技大学学报(医学版);2012年02期

【共引文献】

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1 刘刚;卢光t;;人类生精相关基因TSARG6的原核表达和抗体制备[J];华中科技大学学报(医学版);2010年04期

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【二级参考文献】

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【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李生伟;甘霖;王一如;刘长安;龚建平;李钺;李友伟;;TIMP-3对内皮细胞增殖抑制作用的研究[J];重庆医科大学学报;2006年01期

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3 范冰,鞠桂芝 hour after irradiation accompanied by G，

本文编号：774076