细粒棘球蚴原头节3种重组抗原的双向电泳定位分析

发布时间：2017-09-03 11:39

  本文关键词：细粒棘球蚴原头节3种重组抗原的双向电泳定位分析

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【摘要】：目的利用已有的细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)原头节3种重组抗原rEgZW-5、rEg14-3-3和rEgP-29获得特异性抗体,以识别双向电泳图谱中相应的蛋白位点。方法十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)初步分离细粒棘球蚴原头节蛋白,预判断蛋白分布情况。应用双向电泳技术分离原头节蛋白,PDquest软件分析原头节的蛋白质数量、相对分子质量(Mr)和等电点(IP)。用原头节的3种重组蛋白rEgZW-5、rEg14-3-3和rEgP-29分别免疫新西兰家兔,制备血清,纯化抗体。蛋白质印迹(Western blotting)鉴定特异性抗体对原头节双向电泳图谱中相应蛋白的识别。结果SDS-PAGE结果显示,细粒棘球蚴原头节蛋白主要分布于Mr18 000～90 000区域。双向电泳分离出240个蛋白位点,为Mr15 790～117 050,IP为4.0～9.5,其中85.8%(206/240)蛋白等电点为5～9。Western blotting结果显示,rEg14-3-3特异性抗体可识别细粒棘球蚴原头节双向电泳图谱中约为Mr33 000、IP为4.86的14-3-3蛋白位点,rEgZW-5特异性抗体可识别约为Mr23 000、IP为4.98的ZW-5蛋白位点,rEgP-29特异性抗体可识别约为Mr29 000、IP为5.65的P-29蛋白位点。结论细粒棘球蚴原头节的3种重组抗原rEgZW-5、rEg14-3-3和rEgP-29的抗体可识别双向电泳图谱中相应的蛋白位点。
【作者单位】： 宁夏医科大学医学科学技术研究中心;宁夏医学科学研究所;宁夏医科大学实验动物中心;
【关键词】： 细粒棘球蚴 原头节 重组抗原 双向电泳
【基金】：国家自然科学基金(No.30960360)~~
【分类号】：R383.33
【正文快照】： 细粒棘球蚴病又称囊性包虫病,是棘球绦虫的幼虫寄生于中间宿主体内引起的一种人兽共患病。该病广泛流行于世界各地畜牧业发达地区,严重危害人畜健康。全球约有400万人感染棘球蚴病,4 000万人受到该病威胁[1,2]。在棘球蚴病的防治研究中,无论是筛选早期诊断抗原、新的疫苗候选

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本文编号：784814