十二指肠钩虫热休克蛋白HSP60基因的克隆及重组表达

发布时间：2017-09-04 23:19

  本文关键词：十二指肠钩虫热休克蛋白HSP60基因的克隆及重组表达

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【摘要】：目的克隆十二指肠钩虫(Ancylostoma duodenale)热休克蛋白60(heat shock protein 60,HSP60)基因,并在大肠埃希菌中表达获得重组AduHSP60蛋白。方法以十二肠钩虫成虫cDNA为模板,PCR扩增AduHSP60基因。将获得的目的基因编码序列连接至原核表达载体pETHF,构建重组表达质粒pETHF/AduHSP60。重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达、Ni-NTA亲和层析分离纯化重组蛋白,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达及纯化情况。结果成功扩增到AduHSP60全长编码序列,编码序列长度为1 701bp,编码566个氨基酸。构建了重组表达质粒pETHF/AduHSP60,经诱导表达、分离纯化获得了分子质量单位为60ku的可溶性重组AduHSP60蛋白。结论本研究从十二指肠钩虫中分离获得了HSP60基因,构建的pETHF/AduHSP60重组质粒能在大肠埃希菌中表达重组蛋白,为进一步研究AduHSP60的生物学功能奠定了基础。
【作者单位】： 广东医学院寄生虫学暨临床寄生虫检验学教研室;
【关键词】： 十二指肠钩虫 热休克蛋白 克隆 原核表达
【分类号】：R383.13
【正文快照】： 热休克蛋白是生物体在不利环境因素(如高温、缺氧、病原入侵、重金属污染和饥饿等)刺激下应激合成的一组特殊的蛋白质[1]。根据同源程度及分子质量大小,热休克蛋白可分为HSP110、HSP90、HSP70、HSP60及小HSP家族,其中HSP60是HSPs家族中一个大的家族。HSP60是近10年来研究与免

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本文编号：794432