稳定表达Trop-2基因的NIH3T3细胞系的构建和特性分析
本文关键词:稳定表达Trop-2基因的NIH3T3细胞系的构建和特性分析
【摘要】:目的:建立稳定表达人滋养层细胞表面抗原(Trop-2)NIH3T3细胞,分析过表达Trop-2对NIH3T3细胞的生长、增殖和侵袭特性的影响。方法:将Trop-2基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1,转染NIH3T3细胞,通过G418筛选及RT-PCR鉴定获得稳定表达Trop-2的NIH3T3细胞(NIH3T3-Trop-2)。用MTS法检测NIH3T3-Trop-2细胞的增殖能力,软琼脂集落形成实验检测NIH3T3-Trop-2细胞的克隆形成能力,明胶酶谱法检测NIH3T3-Trop-2细胞的基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的分泌及细胞划痕实验检测NIH3T3-Trop-2细胞的迁移能力。结果:稳定表达Trop-2的NIH3T3细胞在生长增殖、克隆形成及侵袭能力均较NIH3T3细胞强,细胞培养上清中的MMP-2和MMP-9增多。结论:Trop-2对细胞的增殖与迁移能力具有明显的促进作用。
【作者单位】: 南京军区军事医学研究所;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室;江苏省血液中心;
【关键词】: Trop- NIHT 真核表达 增殖与迁移
【基金】:国家自然科学基金资助(81101704) 南京市科技局(201201090)
【分类号】:R341
【正文快照】: 人滋养层细胞表面抗原(human trophoblast cellsurface antigen,Trop-2),又称GA733-1,EP1,M1S1,TACSTD2,是一种细胞表面糖蛋白。Trop-2在早期胚胎发育的胎盘滋养层细胞表面,在正常人体细胞组织很少表达,但在人滋养层细胞和上皮细胞癌组织中(包括乳腺癌、直肠癌、肺癌和前列腺
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