吞噬凋亡淋巴细胞的未成熟树突细胞对脂多糖介导激活的抑制作用研究

发布时间：2017-09-08 00:35

  本文关键词：吞噬凋亡淋巴细胞的未成熟树突细胞对脂多糖介导激活的抑制作用研究

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【摘要】：目的探讨吞噬经体外光化学法(PUVA)处理的同种异基因淋巴细胞的未成熟树突细胞(imDC)对脂多糖(LPS)介导的树突细胞(DC)激活的抑制作用。方法分离C57BL/6小鼠骨髓细胞,经小鼠重组白细胞介素4(rmIL-4)和重组粒-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)共同诱导培养制备骨髓来源的C57BL/6小鼠imDC。分离BALB/c小鼠脾淋巴细胞(SP),经PUVA处理制备成PUVA-SP。在体外将BALB/c小鼠的PUVA-SP与C57BL/6小鼠骨髓来源的imDC共同培养,获得PUVA-SP DCs。在上述imDC和PUVA-SP DCs中分别加入10ng/ml LPS刺激24h,获得LPS DCs。采用ELISA法检测上清中IL-10和IL-12的浓度,流式细胞仪检测细胞表面MHC-Ⅱ、CD40、CD86和CD80的表达水平。结果 LPS刺激后,PUVA-SP DCs表面分子CD80、CD86、CD40的表达分别为21.26%、38.50%和39.78%,远远低于imDC经LPS刺激后的表达(50.58%、66.29%、71.20%,P0.01)。LPS刺激后PUVA-SP DCs和imDCs MHC-Ⅱ的表达分别为67.29%和68.64%,差异无统计学意义(P0.05)。LPS刺激后,PUVA-SP DCs和imDCs分泌IL-10的水平分别为435.6±13.9pg/ml和132.6±2.8pg/ml,与刺激前相比均增高,但前者增高的水平要显著高于后者(P0.01)。LPS刺激后,imDCs分泌高水平的IL-12,其p70和p40的表达量分别为192.1±5.9和999.8±26.9pg/ml,而PUVA-SP DCs分泌IL-12的水平分别为p7018.56±1.3pg/ml,p40 15.22±1.2pg/ml,显著低于imDCs,差异有统计学意义(P0.01)。结论 PUVA-SP DCs虽然表达不成熟表型,但其功能不同于imDC,对LPS刺激具有抑制作用,适用于诱导体内免疫耐受。
【作者单位】： 解放军309医院全军器官移植研究所器官移植与免疫调节北京市重点实验室;
【关键词】： 树突细胞 免疫耐受 脂多糖类
【基金】：国家自然科学基金青年基金(81102242) 北京市科技专项2011阶梯计划(Z111102055311086) 中国博士后基金(200902680,20080441308)~~
【分类号】：R392.4
【正文快照】： 树突细胞(DC)作为体内最有效的抗原呈递细胞(APC),不但具有免疫激活作用,而且在一定的成熟状态下可诱导免疫耐受。DC的免疫调节作用与其发育成熟状态密切相关[1-3],未成熟DC(imDC)具有免疫负向调控作用,但在直接用于诱导移植免疫耐受的过程中,imDC易被刺激成熟,尤其是在体内

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