脂肪酸合成酶系多基因表达载体的构建

发布时间：2017-09-10 00:41

  本文关键词：脂肪酸合成酶系多基因表达载体的构建

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【摘要】：目的利用独立表达盒法构建脂肪酸去饱和酶基因和延长酶基因的四基因表达载体进一步研究多基因表达载体中各个基因表达的相互影响。方法利用基因工程的方法扩增2个脂肪酸去饱和酶基因和2个延长酶基因,然后连接到pcDNA3.1(-)哺乳动物表达载体上,之后转化、筛选、酶切鉴定。最后脂质体法瞬时转染HK293T细胞,提取RNA检测这四个基因的表达情况。结果成功构建了含脂肪去饱和酶基因和延长酶基因的四基因表达载体pcDNA3.1-EF,并在HK293T细胞中成功表达。结论四基因表达载体pcDNA3.1-EF在HK293T细胞中成功表达,单个基因在表达载体中的次序对基因的表达没有明显影响。
【作者单位】： 佳木斯大学;
【关键词】： 多不饱和脂肪酸 多基因表达载体 脂肪酸去饱和酶 脂肪酸延长酶
【基金】：国家自然科学基金(No.310000984) 黑龙江省研究生创新基金(No.YJSCX2012-367HLJ) 黑龙江省教育厅科学技术研究项目(No.12511563)
【分类号】：R341
【正文快照】： 在多不饱和脂肪酸(PUFAs)合成过程中最重要的一类酶为脂肪酸去饱和酶,它们以其自身的酶活性特异地在碳链上的特定位置引入双键,从而产生去饱和作用。其中,△6去饱和酶以18∶2n-6和18∶3n-3以及少量的16∶1n-7和18∶1n-9为反应底物,是参与PUFAs生物合成的第一个限速酶;△5去饱

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本文编号：823719