抗心型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体制备、鉴定和在侧向免疫层析方法中的应用

发布时间：2017-09-11 03:22

  本文关键词：抗心型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体制备、鉴定和在侧向免疫层析方法中的应用

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【摘要】：目的:制备抗心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)单克隆抗体(mAb),并建立侧向免疫层析方法检测血浆中H-FABP。方法:用H-FABP蛋白免疫纯系Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术建立能稳定分泌抗人H-FABP的单克隆杂交瘤细胞株。常规制备腹水,纯化后得到特异性抗H-FABP单克隆抗体,进行效价、特异性、亲和力的鉴定分析,并在ELISA平台进行抗体配对,用所筛选到的抗体对初步建立了检测H-FABP的侧向免疫层析方法。结果:成功获得12株稳定分泌抗体的阳性细胞株,并筛选出能相互配对,并应用于侧向免疫层析平台的抗体3D1和5F4,检测临床样品与对照试剂比较总符合率为100%。结论:筛选能稳定分泌抗体的细胞株,配对抗体应用于侧向免疫层析检测方法中,能快速、特异、灵敏的检测出临床样品中H-FABP,为临床应用快速检测H-FABP指标提供了方法和关键材料。
【作者单位】： 华南理工大学生物科学与工程学院;自检型快速诊断国家地方联合工程实验室广州万孚生物技术股份有限公司;
【关键词】： H-FABP 单克隆抗体 POCT 免疫层析
【基金】：卫生部《重组蛋白和抗体库研制平台》资助项目(2011ZX09506-001)
【分类号】：R392
【正文快照】： 自R.K.Ockner等人1972年发现脂肪酸结合蛋白以来,人们陆续分离并鉴定了9种不同类型的脂肪酸结合蛋白[1-2],不同型FABP的氨基酸序列的同源性为38%～70%。H-FABP是一种可溶性蛋白,分子量为14～15kDa,大量存在于心肌细胞质中,占胞质蛋白的15%[3-5]。正常状况下,血液中不含或仅含

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本文编号：828331