Noxa基因的克隆及其诱导A549细胞凋亡的研究
本文关键词:Noxa基因的克隆及其诱导A549细胞凋亡的研究
【摘要】:目的克隆人Noxa基因,构建真核表达质粒pcDNA-Noxa,将重组质粒pcDNA-Noxa转染人肺癌A549细胞株,并观察重组质粒pcDNA-Noxa诱导A549细胞凋亡的作用。方法使用RT-PCR的方法扩增出Noxa基因,克隆至真核表达质粒pcDNA(-),构建出重组质粒pcDNA-Noxa。将重组质粒pcDNA-Noxa转染人肺癌A549细胞株,使用Western blot的方法检测Noxa基因的过表达;使用Hoechst 33258染色,观察A549细胞的凋亡;使用MTT法检测细胞活力。结果经酶切和测序鉴定,重组质粒pcDNA-Noxa构建成功。Western blot检测出Noxa基因的过表达;Hoechst 33258染色和MTT实验发现:重组质粒pcDNA-Noxa能明显诱导A549细胞出现凋亡现象。结论本实验初步探索了Noxa基因的促凋亡作用,为以后进一步深入研究Noxa基因的促凋亡功能基础。
【作者单位】: 成都医学院;湖北医药学院
【关键词】: Noxa 克隆 真核表达 凋亡
【基金】:四川省教育厅面上项目(No.11ZB170) 四川省卫生厅科研课题(No.120489) 成都医学院校基金(No.CYZ10-004,No.CYZ11-0059) 成都医学院学科建设项目(No.CYXK2012005)资助
【分类号】:R363
【正文快照】: 以手术、化疗和放疗为基础的综合治疗是目前最主要的治疗肿瘤的方式。虽然这些传统的治疗方法已经取得了很大的进展,但达到的效果有限。目前有些常见的肿瘤如肺癌的5年生存期仅为12%、胃癌约23%、卵巢癌约40%[1],所以人们开始寻求新的治疗手段,而选择性诱导肿瘤细胞凋亡便成
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 施一公;孙兵法;;细胞凋亡的结构生物学研究进展[J];生命科学;2010年03期
2 张明;辛晓燕;李红梅;宋晖;;hTERT启动子驱动的TRAIL诱导宫颈癌细胞的凋亡作用[J];细胞与分子免疫学杂志;2007年07期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 曹康;林超;戴谦;李磊;雷庭钧;谢意;汤明海;袁铸;;人凋亡相关新基因PNAS-4的克隆、原核表达与纯化[J];四川大学学报(医学版);2012年04期
2 刘忠昌;贾永森;包巨太;;通幽汤及其拆方对食管鳞癌细胞的抑制作用及其机理研究[J];江苏中医药;2011年07期
3 田力;李伟伟;李鹏飞;张蕾;;人端粒酶启动子(hTERTp)真核表达载体的构建[J];辽宁医学院学报;2008年06期
4 贾永森;李继安;韩炳生;;从证候分子本质论食管癌血瘀病机[J];辽宁中医杂志;2012年08期
5 刘镭;张真真;;实时监测溶酶体光损伤诱导细胞凋亡过程中Bax定位的时空变化[J];激光生物学报;2013年03期
6 袁铸;严飞;赵新宇;邓洪新;李炯;;小鼠凋亡相关新基因PNAS-4真核表达载体的构建、表达及体外抗肿瘤作用[J];细胞与分子免疫学杂志;2007年12期
7 张宽;许信刚;童德文;丁丽;李兆才;李伟;;牛疱疹病毒Ⅰ型诱导MDBK细胞凋亡的初步研究[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2011年12期
8 张蕾;田力;李伟伟;李鹏飞;;端粒酶启动子突变对EGFP启动效率影响[J];中国公共卫生;2010年08期
9 张蕾;金辉;田力;李伟伟;李鹏飞;;人甲状腺鳞癌细胞中端粒酶启动子功能分析[J];中国公共卫生;2011年02期
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 王建;靶向hTERT的RNA干扰及其对肿瘤细胞增殖、凋亡影响的机制研究[D];中国医科大学;2008年
2 李佳;APE1的氧化还原功能在卵巢癌铂类耐药中的作用研究[D];第四军医大学;2013年
3 吴正三;猪体细胞核移植相关影响因素的研究[D];广西大学;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前6条
1 赵丹红;家蚕BmICE-912基因的克隆与功能研究[D];西南大学;2011年
2 张曦;NF-κB、Bc1-2、TGF-β1在酒精性脂肪肝患者血清中的表达及相关性[D];兰州大学;2011年
3 王越;肺炎链球菌溶血素致脑损伤细胞凋亡及凋亡诱导因子的表达及意义[D];郑州大学;2011年
4 赵燕;BH3 mimetics分子优化的量热学研究[D];大连理工大学;2013年
5 武炜;RNAi沉默IGF-1R表达对宫颈癌Hela细胞生长和药物敏感性的实验研究[D];苏州大学;2013年
6 黄玉玲;大黄素衍生物E11对淋巴细胞白血病细胞株Molt-4及CA46的作用及其机制研究[D];福建医科大学;2013年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 宋悦,孔北华,马道新,刘培淑,江森;宫颈癌及子宫内膜癌细胞系中hTERT启动子活性的研究[J];肿瘤防治杂志;2003年03期
2 李红梅;宋天保;于月成;曹云新;王红英;宋晖;张明;;hTERT基因核心启动子调控的TRAIL基因表达载体的构建及对卵巢癌细胞凋亡的影响[J];细胞与分子免疫学杂志;2006年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈爱娟,廖春良;“克隆技术”与“克隆人”——生物技术对人类的挑战[J];西安交通大学学报(社会科学版);1999年01期
2 鲁蓉,李元建,贺达仁;克隆的意义及其价值取向[J];医学与社会;2000年05期
3 刘亚伟;戴兵;蔡厚安;梅长林;;AnnexinⅡ基因克隆及真核表达载体的构建[J];生物学杂志;2006年03期
4 姬可平;克隆羊与克隆人的生物遗传与伦理[J];中国优生与遗传杂志;1997年02期
5 黄敏;欧东梅;赵霞;徐金环;张晓梅;周剑峰;张义成;;人Gfi1基因克隆及重组Gfi1慢病毒表达载体的构建[J];华中科技大学学报(医学版);2009年06期
6 奇云;克隆人向我们走来——人体胚胎克隆研究的新进展(一)[J];当代医学;2000年12期
7 ;让昨天告诉今天:干细胞多能性相关研究的学术与技术进展[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年23期
8 王雪松;李永哲;刘国振;;自身抗原核点蛋白Sp100基因克隆和真核表达[J];世界华人消化杂志;2006年08期
9 李进;刘妍;张玲霞;;乙型肝炎病毒X蛋白的功能研究进展[J];人民军医;2006年04期
10 曹智;马骏;袁文俊;林丽;;热休克蛋白60与细胞凋亡[J];生理科学进展;2008年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 肖乐;党永明;时德;;含人C型利钠肽基因真核表达质粒的构建及其对血管内皮细胞增殖的作用[A];第四届全国烧伤救治专题研讨会烧伤感染救治新进展论文汇编[C];2006年
2 陈建忠;朱海红;陈智;刘克洲;;小鼠TLR3真核表达质粒的构建及其活性初步鉴定[A];浙江省免疫学会第五次学术研讨会论文汇编[C];2004年
3 李晖;任小华;钟森;任红;;结核分支杆菌含信号肽的mtb8.4基因的克隆及真核表达质粒的构建[A];中国防痨杂志2003第25卷增刊——2003年中国防痨协会全国学术会议论文集[C];2003年
4 王晓东;林镯;张友才;陈永平;许烂漫;陈国荣;巩跃文;;大鼠肝细胞生长因子与肝再生增强因子融合基因真核表达质粒的构建及鉴定[A];2009香港-北京-杭州内科论坛暨2009年浙江省内科学学术年会论文汇编[C];2009年
5 林绮萍;吴少庭;翁亚彪;袁仕善;高世同;秦莉;雷明军;潘晖榕;张仁利;黄达娜;温见翔;;SARS病毒N蛋白真核表达质粒的构建及其诱导的体液免疫应答[A];全国新出现传染病学术研讨会资料汇编[C];2004年
6 李丹莉;张昌菊;柳长柏;;pIRES-CRT/E2-SLC真核表达质粒的构建、表达的实验研究[A];第十届全国生化与分子药理学术会议论文摘要汇编[C];2007年
7 蒋玉凤;;结核分支杆菌抗原ESAT-6基因真核表达质粒的构建及蛋白表达的鉴定[A];中国防痨杂志2003第25卷增刊——2003年中国防痨协会全国学术会议论文集[C];2003年
8 黄达娜;吴少庭;袁仕善;张仁利;高世同;龙彩虹;林琦萍;雷明军;潘晖榕;;弓形虫SAG1真核表达质粒的体外表达及其诱导的细胞免疫应答[A];全国新出现传染病学术研讨会资料汇编[C];2004年
9 袁仕善;吴少庭;黄达娜;张仁利;高世同;余新炳;;弓形虫GRA8真核表达质粒的构建与体外表达[A];全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2006年
10 李建远;;IL-2-preS融合蛋白表达质粒的基因枪注射DNA免疫研究[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(上册)[C];2001年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 李恩青;克隆人胚横空出世 克隆疗法有戏没戏[N];中国高新技术产业导报;2001年
2 倪永华;克隆人之门能不能关上[N];科技日报;2004年
3 ;生物医学大盘点(上)[N];中国医药报;2003年
4 聂翠蓉;克隆婴儿不安全非人道[N];科技日报;2002年
5 毛磊;人类胚胎干细胞首次克隆成功[N];医药经济报;2004年
6 记者 任海军;美公助干细胞研究,严防“克隆人”[N];新华每日电讯;2009年
7 张田勘;’2002生物医学大盘点(下)[N];科技日报;2002年
8 高冲;克隆器官何时造福人类[N];中国税务报;2001年
9 曲笑;美国将规范干细胞研究[N];中国医药报;2001年
10 本报记者 白毅;胚胎干细胞让人欢喜让人忧[N];中国医药报;2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张国际;副粘病毒Tianjin株HN和F基因真核表达质粒的构建及其对幼鼠免疫效果的评价[D];天津医科大学;2007年
2 许熊飞;调节性树突状细胞诱导CD4~+T细胞凋亡及促进记忆性CD4~+T细胞产生的实验研究[D];第二军医大学;2008年
3 张守纯;p16真核表达载体的构建及其转基因的研究[D];中国医科大学;2004年
4 徐冰;骨髓间质干细胞对1-甲基4-苯基吡啶离子诱导的PC12细胞凋亡的保护作用[D];中国医科大学;2007年
5 邵圣文;丙型肝炎病毒F蛋白抗原性、抗凋亡作用及细胞内磷酸化研究[D];第二军医大学;2007年
6 张业;抑癌基因产物p53在热休克蛋白基因表达调控中的作用[D];中国协和医科大学;2000年
7 黄河;Flt3配体基因的克隆、表达及生物学活性鉴定[D];吉林大学;2006年
8 徐金华;HSV-2多表位复合DNA疫苗的构建与诱导小鼠免疫效果的研究[D];复旦大学;2006年
9 华瑞;体内增强治疗性乙型肝炎核酸疫苗免疫应答的研究[D];吉林大学;2006年
10 陈佳玉;丙型肝炎治疗性DNA疫苗的实验研究[D];吉林大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 谭洁琼;SARS-CoV S1蛋白在哺乳动物细胞的表达和纯化[D];南华大学;2005年
2 康春雨;人骨形态发生蛋白-2真核表达质粒的制备、转染及表达[D];东南大学;2005年
3 王耀晟;表达hVEGF_(121)/EGFP的间充质干细胞制备及缺氧对其表达影响[D];南昌大学;2007年
4 张国英;RNA干扰对HepG2细胞AFP基因表达的影响[D];山西医科大学;2005年
5 唐文琴;人生长激素受体的定点突变及其真核表达[D];江西师范大学;2007年
6 胡国勇;17β-雌二醇对ox-LDL诱导人外周血内皮祖细胞凋亡的影响[D];泸州医学院;2009年
7 胡艳;髓系细胞触发受体-1真核表达质粒的构建及鉴定[D];浙江大学;2011年
8 雷建园;真核表达质粒pSG5-Oct4的构建及瞬时表达的研究[D];天津医科大学;2011年
9 吴汉霞;真核表达质粒PIRES-Ag85B的构建及其在CHO细胞中的表达[D];安徽理工大学;2011年
10 杨硕;pcDNA3/PD-L1及pcDNA3/B7.1真核表达质粒的构建及免疫作用的初步研究[D];河北医科大学;2013年
,本文编号:829124
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