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Noxa基因的克隆及其诱导A549细胞凋亡的研究

发布时间:2017-09-11 06:27

  本文关键词:Noxa基因的克隆及其诱导A549细胞凋亡的研究


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【摘要】:目的克隆人Noxa基因,构建真核表达质粒pcDNA-Noxa,将重组质粒pcDNA-Noxa转染人肺癌A549细胞株,并观察重组质粒pcDNA-Noxa诱导A549细胞凋亡的作用。方法使用RT-PCR的方法扩增出Noxa基因,克隆至真核表达质粒pcDNA(-),构建出重组质粒pcDNA-Noxa。将重组质粒pcDNA-Noxa转染人肺癌A549细胞株,使用Western blot的方法检测Noxa基因的过表达;使用Hoechst 33258染色,观察A549细胞的凋亡;使用MTT法检测细胞活力。结果经酶切和测序鉴定,重组质粒pcDNA-Noxa构建成功。Western blot检测出Noxa基因的过表达;Hoechst 33258染色和MTT实验发现:重组质粒pcDNA-Noxa能明显诱导A549细胞出现凋亡现象。结论本实验初步探索了Noxa基因的促凋亡作用,为以后进一步深入研究Noxa基因的促凋亡功能基础。
【作者单位】: 成都医学院;湖北医药学院
【关键词】Noxa 克隆 真核表达 凋亡
【基金】:四川省教育厅面上项目(No.11ZB170) 四川省卫生厅科研课题(No.120489) 成都医学院校基金(No.CYZ10-004,No.CYZ11-0059) 成都医学院学科建设项目(No.CYXK2012005)资助
【分类号】:R363
【正文快照】: 以手术、化疗和放疗为基础的综合治疗是目前最主要的治疗肿瘤的方式。虽然这些传统的治疗方法已经取得了很大的进展,但达到的效果有限。目前有些常见的肿瘤如肺癌的5年生存期仅为12%、胃癌约23%、卵巢癌约40%[1],所以人们开始寻求新的治疗手段,而选择性诱导肿瘤细胞凋亡便成

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本文编号:829124

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