Osbpl2基因在高脂血症小鼠模型中的表达与定位

发布时间：2017-09-16 20:26

  本文关键词：Osbpl2基因在高脂血症小鼠模型中的表达与定位

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【摘要】：目的：观察Osbpl2基因在高脂血症小鼠耳蜗中的表达,探讨高脂饮食干预对小鼠听力的影响机制。方法：选择出生6周C57BL/6J小鼠65只(南京大学模式动物研究所提供),随机分为高脂组(40只)和对照组(25只),分别采用高脂饲料(南京协同生物,脂含量60%)和普通饲料喂养。8周后,各小鼠均在深度麻醉状态下行短纯音听性脑干反应(auditory brainstem response, ABR)测试(美国TDT公司BioSig System Ⅲ型),使用试剂盒测量血脂水平(中生北控生物科技股份有限公司)；随后,快速断头分离耳蜗后OCT包埋、切片,行免疫荧光组织化学来观察Osbpl2基因的分布及表达情况,扫描电镜观察静纤毛排列情况,取耳蜗等多种组织提取RNA进行相关基因的表达分析。结果：1)高脂组小鼠的高频听力损失较对照组明显；2)高脂组小鼠的总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、动脉硬化指数均高于对照组小鼠,高密度脂蛋白低于对照组；3)激光共聚焦显微镜观察小鼠耳蜗切片及耳蜗基底膜铺片,Osbpl2基因在高脂组及对照组小鼠耳蜗血管纹、毛细胞、螺旋神经节处均有表达,但高脂组的表达明显低于对照组。正常对照组小鼠基底膜铺片可见完整排列的内毛细胞和外毛细胞,高脂血症组小鼠基底膜铺片可见外毛细胞缺失、排列紊乱；4)荧光定量PCR分析小鼠8种组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉、脑、耳蜗)中Osbpl2基因的表达情况,结果显示高脂组各组织的Osbpl2基因相对定量均低于正常对照组,此现象在耳蜗中更加明显(p0.01)；5)电镜扫描结果显示高脂血症小鼠内毛细胞静纤毛倒伏,外毛细胞静纤毛缺失、排列紊乱,此现象在底回尤为明显。结论：Osbpl2基因在小鼠耳蜗中广泛表达；高脂饮食干预引发的高脂血症可导致小鼠的听力下降和内耳形态学改变,而Osbpl2下调可能在高脂血症小鼠听力损失的发生中起重要作用。
【关键词】：Osbpl2基因 高脂血症 小鼠 听力损失 听性脑干反应 免疫组化 扫描电镜
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R589.2;R-332
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-12
• 材料与方法12-18
• 结果18-27
• 讨论27-35
• 参考文献35-41
• 文献综述41-63
• 参考文献53-63
• 攻读学位期间发表文章情况63-64
• 致谢64

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本文编号：865249