NALP3富含亮氨酸重复序列结构域识别人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白

发布时间：2017-09-17 03:27

本文关键词：NALP3富含亮氨酸重复序列结构域识别人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白

【摘要】：目的:寻找与NALP3富含亮氨酸重复序列(leucine-rich repeat,LRR)结构域相互作用的蛋白质分子。方法:克隆NALP3富含亮氨酸重复序列(NALP3-LRR)结构域的DNA序列并经测序检验。应用酵母双杂交技术,构建以NALP3-LRR结构域为诱饵基因的酵母双杂交载体,对人胚肺cDNA文库进行杂交筛选,经酵母回交实验验证蛋白质在酵母细胞内的相互作用并对阳性克隆的DNA进行序列测定和生物信息学分析。将筛选到的阳性克隆进一步用免疫共沉淀实验验证NALP3-LRR结构域与阳性蛋白之间相互作用的可靠性。结果:成功克隆NALP3-LRR结构域的DNA序列并经测序检验正确。用酵母双杂交技术对人胚肺cDNA文库进行酵母杂交筛选共获得4个阳性克隆。免疫共沉淀实验证实能与NALP3-LRR结构域发生相互作用的阳性蛋白是人细胞周期蛋白H和禽传染性支气管炎病毒株Cal99的ORF1a。结论:NALP3的富含亮氨酸重复序列结构域能与人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白发生相互作用。
【作者单位】：暨南大学医学院病理生理学教研室国家中医药管理局病理生理学实验室;南方医科大学病理生理学教研室;山西医科大学人体解剖学教研室;
【关键词】： NALP蛋白 富含亮氨酸重复序列 人细胞周期蛋白H 禽传染性支气管炎病毒 酵母双杂交系统
【基金】：广东省高等学校自然科学重点研究项目(No.05Z002) 广东省自然科学基金资助项目(No.S2012010008161)
【分类号】：R392
【正文快照】： 固有免疫(innate immunity)是多细胞生物抗御病原体感染和抗肿瘤的第一道防线。固有免疫细胞通过表达模式识别受体(pattern-recognition receptors,PRRs)识别病原体相关分子模式(pathogen-associatedmolecular patterns,PAMPs),启动机体的生物防御机能。Toll样受体[1](Toll-li

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